Detección de Mycobacterium bovis en leche caprina por la reacción en cadena de la polimerasa: evaluación de dos secuencias blanco

MAGNANO G,; GARRO C,; ZUMÁRRAGA MJ; ROCHA RV,; STICOTTI E,; BIGI F.; MACIAS A,; SCHNEIDER M,; EIRIN ME,

La Plata

Congreso; I Congreso Virtual de Microbiología Veterinaria.; 2021

Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de la Plata.

El complejo Mycobacterium tuberculosis (CMT) está conformado por distintas especies de micobacterias patógenas que causan tuberculosis en distintos hospedadores. En el ganado caprino la tuberculosis ocurre por Mycobacterium bovis (M. bovis) y Mycobacterium caprae (M. caprae), aunque este último no fue descripto en Argentina hasta el momento. La infección por M. bovis en cabras es menos frecuente que en el bovino, siendo su prevalencia variable según el año y la región en estudio (0,67-7,3 %). La lucha contra la TB está basada en su detección y control, requiriéndose de técnicas de diagnóstico rápidas, sensibles y específicas. La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) permite identificar la presencia de micobacterias del CMT, como M. bovis y M. caprae, en distintos tipos de muestras, como la leche. El objetivo de este trabajo fue evaluar dos secuencias blanco para detectar CMT en leche caprina por PCR de punto final. Se estudiaron 24 muestras de leche caprina de animales reaccionantes a la prueba tuberculínica. Esas cabras fueron faenadas, cultivados sus órganos y su leche, y los aislamientos obtenidos fueron tipificados por spoligotyping. Se amplificaron las secuencias IS6110 y Rv2807 por PCR Touch-Down. Once de las 24 muestras (45,8 %) resultaron positivas tanto por PCR-IS6110 como PCR-Rv2807, mientras que las 13 (54,2 %) restantes resultaron negativas. En 8/11 (73 %) de las muestras con PCR positiva, se confirmó la presencia de M. bovis por cultivo y spoligotyping (espoligotipo SB0140, el más frecuente de las muestras analizadas de Argentina). Todos los cultivos de leche resultaron negativos. La sensibilidad y especificidad de la PCR frente al cultivo de órganos fueron 42,9 y 88,1 % respectivamente. El proceso de descontaminación de las muestras previo al cultivo puede matar hasta el 90 % de los bacilos presentes, factor crítico en muestras pausibacilares. En este trabajo se demostró la concordancia entre los resultados de la PCR-IS6110 y PCR-Rv2807, siendo ambas adecuadas para la detección de M. bovis en leche caprina, constituyendo una estrategia valiosa que podría complementar a las técnicas oficiales de diagnóstico en la vigilancia epidemiológica a nivel de majada.