Patogénesis y respuesta inmune en cerdos domésticos sometidos a sensibilización micobacteriana previa a la infección experimental con una cepa porcina de Mycobacterium bovis

GRAVISACO, MARÍA JÓSE; MOYANO, ROBERTO DAMIAN; JUSTE, RAMON; COLOMBATTI OLIVIERI, M. ALEJANDRA; BARANDIARAN, SOLEDAD; ROMANO, MARÍA ISABEL; CUERDA, XIMENA; MARFIL, JIMENA; ZUMÁRRAGA, MARTIN; SANTANGELO, MARÍA DE LA PAZ

Buenos Aires

Jornada; X Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2021

Mycobacterium bovises el principal agente causal de la Tuberculosis (TB) en cerdos en países donde la TB bovina es endémica. En Argentina, así como en otros países,el control y erradicación de la enfermedad se ven comprometidos por la persistencia de la enfermedad en especies domésticas y silvestres, que actúan como reservorio de M. bovis. Es así que el cerdo juega un rol epidemiológico fundamental como mantenedor de la enfermedad, pudiendo actuar también como diseminador de la misma.Con el objetivo de comprender la patogénesis y la respuesta inmune del hospedador, en cerdos infectados con M. boviscontribuir al desarrollo de estrategias de control de y herramientas para combatir esta enfermedad zoonótica, , nos propusimos estudiar la virulencia de unacepa local de M. bovis aislada de porcinos, en cerdos experimentalmente infectados, previamente sensibilizados con M. bovis.Para llevar adelante este ensayo, se utilizaron 20 lechones sus scrofa doméstica, de un mes de edad, los cuales fueron divididos en dos grupos homogéneos.Uno recibió dos dosis orales, separadas por un mes, de una suspensión de M. bovis inactivada por calor, y recibió la intradermorreacción (IDR) doble comparativa con pdb y ppd aviar. Este grupo llamado MS, multiple sensibilizado. El otro grupo recibió únicamente la IDR doble comparativa , por lo que fue llamado, simple sensibilizado(Grupo SS). Posteriormente ambos grupos fueron infectados por vía oral con una suspensión de M. bovis cepa 894 asilada de cerdosMensualmente se tomaron muestras de suero para estudiar la respuesta inmune humoral a través de un ELISA. A los 170 días se realizó la eutanasia y necropsia de todos los animales, donde se estudiaron las lesiones de linfonódulos y órganos para determinar el score macroscópico. Así mismo, se tomaron muestras para histopatología . Ss colorearon con hematoxilina y eosina y se examinaron distintos tipos de lesionespara establecer el score microscópico. Se estudio la cantidad de granulomas, la presencia de fibrosis, necrosis, celulas gigantes y calcificacion. A cada lesión se le atribuyó un puntaje, y la sumatoria de dichos puntajes definió el score de lesión microscópica. También se tomaron muestras para cultivo y asilamiento bacteriológico.Los resultados obtenidos nos permitieron observar que la infección por vía oral con la cepa 894 deM. bovis, produjo enfermedad en todos los animales. Para facilitar la interpretación de los resultados, se realizo la sumatoria del score macros y micro de cada órgano, obteniendo el total de lesión macroscópica y microscopia. En el grafico de la izquierda Observamos que ambos grupos desarrollaron la enfermedad con presencia de lesiones compatibles con tuberculosis y lesión histopatológica., como observamos en la tabla, Al estudiar estas lesiones histopatológicas encontramos una mayor fibrosis en el grupo ms, con diferencias significativas entre los grupos.,así como también diferencias significativas en la media del score de lesión histopatológica. En el grafico siguiente observamos la evolución de la respuesta inmune humoral . ambos grupos comenzaron a levantar titulo al T140, siendo mayor la respuesta para en el grupo MS. Se estudio correlación entre el score de lesiones macroscopio y la DO obtenida al T170, y observamos que ambos grupos mostraron una correlación lineal, siendo significativa solo para el grupo ss. Esta correlacion nos permitioeubicar a los individuos de ambos grupos en dos áreas: aquella de bajo DO y baja lesión, y alto DO y alta lesión, lo cual estaría relacionado con el tipo de respuesta inmune desarrollada. La sensibilización previa con una suspensión de M. bovis inactivada aumentó ligeramente la intensidad de la respuesta, dado que el grupo MS presentó mayor score de lesiones y mayor fibrosis, y un aumento de la respuesta inmune humoral. Cabe destacar que la sensibilización no arrojó falsos positivos en los resultados de ELISA, en ninguno de los dos grupos. Si bien las diferencias en el score de lesiones entre los grupos no fueron estadísticamente significativas, observamos que la vía de infección utilizada fue capaz de reproducir la enfermedad, y combinada con una sensibilización previa desarrolla lesiones con un componente fibroso más alto, sugerente de una mayor resistencia a la infección. Estos resultados sugieren que mas estudios son necesarios para obtener vacunas efectivas y protectivas, y así evitar efectos negativos y fracasos en el diseño de vacunas para tuberculosis.