Transmisión de Cryptosporidium sp. en establecimientos lecheros de Luján, Buenos Aires, Argentina

CARULLO G.; EIRIN ME; SIMONATO S.; ZUMÁRRAGA MJ.; SCHWAB E.; ANGELINI MV.; SOLANA ME.

San Carlos de Bariloche

Congreso; XXIII Reunión Científico Técnica y 1° Virtual Asociación Argentina de Veterinarios de Laboratorios de Diagnóstico; 2021

AAVLD

Introducción. La criptosporidiosis, zoonosis parasitaria causada por Cryptosporidium sp., infecta a una gran variedad de vertebrados incluyendo al humano y es la principal causa mundial de diarrea parasitaria en bovinos. El género Cryptosporidium incluye numerosas especies, entre ellas C. parvum, de importancia zoonótica e impacto pecuario ya que afecta a terneros menores de 60 días. En Argentina su prevalencia estimada es de 16-29%, siendo Buenos Aires la provincia en la que se localizan la mayor parte de los estudios y C. parvum la especie más prevalente. Su detección en materia fecal se realiza por visualización microscópica de ooquistes teñidos o mediante la detección de un fragmento del gen 18S de ARN ribosomal mediante la técnica de PCR. Los objetivos del presente trabajo fueron: 1) estimar la prevalencia de infección por Cryptosporidium sp. en rodeos lecheros pertenecientes al partido de Luján por detección microscópica y biología molecular; 2) identificar las especies de Cryptosporidium en muestras de materia fecal de bovinos mediante la secuenciación de los productos de PCRtouchdown; 3) determinar los factores epidemiológicos asociados a su transmisión. Materiales y métodos. Para ello, se recolectaron muestras de materia fecal de terneros Bos taurus, raza Holando Argentino en etapa de crianza provenientes de cuatro establecimientos lecheros del partido de Luján, provincia de Buenos Aires. Se realizaron encuestas epidemiológicas a sus propietarios con el fin de registrar datos acerca de las características generales de las guacheras, sistema de crianza, alimentación, sanidad y bienestar/confort animal. Para estimar la prevalencia de infección por microscopía, se investigó la presencia de ooquistes coloreados con la tinción de Kinyoun en frotis de materia fecal. A su vez, se determinó la prevalencia por biología molecular mediante la amplificación de un fragmento del gen de la subunidad menor 18S de ARNr de Cryptosporidium sp. empleando la técnica de PCR-touchdown., con los primers descritos por Xiao et al., 1999. Para identificar las especies de Cryptosporidium presentes en las muestras se realizó la secuenciación de los productos de amplificación, los cuales fueron comparados con secuencias disponibles en la base de datos GenBank. Para determinar los factores predisponentes para adquirir la infección se realizó un estudio de riesgo (Odds ratio). Además, se estimó por regresión logística binaria el efecto de todas las variables en su conjunto. Resultados. La prevalencia general obtenida por microscopía fue de 27%, hallándose diferencias entre los establecimientos estudiados (6,25-60%; p=0,024). A su vez, mediante la técnica de PCR-touchdown se obtuvo un valor de prevalencia general de 16% (Figura 1). En todos los establecimientos fue prevalente C. parvum y en uno de ellos también se detectó C. bovis en menor proporción. El análisis de riesgo demostró que las condiciones de manejo, el tipo de crianza, la alimentación y las características particulares de la guachera representan factores epidemiológicos relevantes en la transmisión parasitaria, y que la infección por Cryptosporidium sp. constituye un factor de riesgo asociado al desarrollo de diarreaDiscusión y conclusión. Así, en el presente trabajo se estudió la infección por Cryptosporidium mediante un abordaje integral incluyendo los factores implicados en su transmisión y la determinación de especies en establecimientos lecheros del partido de Luján, provincia de Buenos Aires. Los datos confirman la presencia de la especie zoonótica C. parvum y demuestran el hallazgo de la especie C. bovis no descrita previamente en el área de estudio. Los resultados obtenidos demuestran que la identificación de factores relevantes que condicionan la transmisión de Cryptosporidium sp., resultan fundamentales para diseñar estrategias de control capaces de mitigar y prevenir los efectos de la infección en rodeos lecheros del partido de Luján, evitar su transmisión al ser humano y controlar la contaminación del medio ambiente con ooquistes. Asimismo, disponer de una técnica alternativa de PCR, optimizada en formato touchdown, de sencilla ejecución, menor duración, costos y probabilidad de contaminación respecto de la PCR anidada descrita por Xiao et al., 1999, constituye una herramienta importante para conocer la circulación de especies de Cryptosporidium sp. en rodeos lecheros y su real impacto en la producción pecuaria.