IVIT   27842
INSTITUTO DE VIROLOGIA E INNOVACIONES TECNOLOGICAS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
DIAGNÓSTICO MEDIANTE AMPLIFICACIÓN ISOTÉRMICA DE ADN DE PARVOVIRUS CANINO - LAMP
Autor/es:
BUCAFUSCO, DANILO; PALACIOS, CARLOS; BARRIOS BENITO, MELANIE; GALDO NOVO, SABRINA; NOVELLINO, GIMENA; BRATANICH, ANA
Lugar:
Ciudad De Buenos Aires
Reunión:
Congreso; IX Jornadas de Jóvenes Investigadores de la Facultad de Ciencias Veterinarias UBA; 2019
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Veterinarias UBA
Resumen:
El parvovirus canino (CPV) es un virus pequeño, desnudo, de genoma ADNsc, conaproximadamente 5000 bases que codifican para proteínas estructurales (VP1, VP2, VP3) yproteínas no estructurales (NS1 y NS2), y es el principal causante de enteritis viral canina yuno de los responsables de muerte neonatal en cachorros. Las cepas CPV-2a y CPV-2b, seencuentran distribuidas mundialmente. En el año 2001 una mutación dio origen a la varianteCPV-2c, la cual actualmente se encuentra en Europa, Australia y Norte y Sur de América.Dada la magnitud de la distribución de este agente viral y la patología que genera en sushuéspedes, resulta fundamental tener al alcance un método diagnóstico capaz de identificarla presencia del mismo de manera rápida, confiable, específica, sensible, práctica yeconómica. La técnica de amplificación isotérmica de ácido nucleico (LAMP, del inglésLoop mediated isothermal amplification) consiste en la amplificación y detección defragmentos específicos de ácido nucleico en condiciones constantes de temperatura,utilizando dos pares de cebadores específicos, mediante el uso de un equipamiento básicopara asegurar las condiciones de la reacción. Las ventajas de esta técnica son su altasensibilidad, especificidad, en relación a la baja complejidad del equipamiento necesario,brindando la posibilidad de una lectura rápida a campo. El objetivo de este trabajo fue evaluarsi con esta aplicación se puede reemplazar la técnica de PCR utilizada actualmente para elservicio de diagnóstico de CPV ofrecido por el laboratorio de Virología de la Facultad deCiencias Veterinarias de la Universidad de Buenos Aires. Se analizaron 58 muestras decontenido de raspaje intestinal, las cuales se testearon previamente por PCR. Para larealización de la técnica de LAMP se siguió el protocolo de Mukhopadhyay y cols., 2013.Los productos finales de reacción se analizaron mediante electroforesis en geles de agarosa,observando en las muestras positivas un patrón de bandas característico. De las 58 muestrastotales evaluadas a la fecha, 24 muestras fueron positivas (41,37%) al ser analizadas porLAMP. Este resultado reveló un 12 % más de muestras detectadas en relación al diagnósticopor PCR. Estos resultados preliminares sugieren que la técnica podría ser considerada comoopción en el diagnóstico; para evaluar la posibilidad de reemplazo de la técnica de PCR porLAMP, un mayor número de muestras deben testearse y realizar un análisis estadístico decorrelación entre los resultados PCR junto con los resultados de LAMP