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La tuberculosis bovina (TBb) es una enfermedad infecciosa crónica que afecta a animalesdomésticos, silvestres y al hombre. Uno de los principales obstáculos para lograr elsaneamiento en el marco del Plan de Control y erradicación de la TBb, es la existencia dereservorios de vida silvestre, los cuales son muy difíciles de identificar, y posteriormente decontrolar. La prueba de ensayo de liberación de interferón-gamma cuantifica el IFNɣproducido por linfocitos-T sensibilizados en respuesta al contacto con antígenos específicosde Mycobacterium bovis mediante la técnica ELISA. De esta manera se mide la respuestainmunitaria de tipo celular específica de memoria que caracteriza a la tuberculosis. Unalimitante de esta técnica es que los kits comerciales están orientados a ser usados en bovinosy bubalinos, quedando muchas especies de animales silvestres fuera del rango. A su vez,estos kits son importados y su costo es muy elevado, dificultando su uso incluso en bovinos.Se propone, mediante un análisis predictivo comparativo, identificar regiones conservadasen la molécula de IFNɣ en 4 especies silvestres relacionadas filogenéticamente (jabalí, pecarí,ciervo axis y venado de las pampas). El fin es obtener un inmunógeno capaz de generaranticuerpos VHHs que reconozcan al marcador de infección en una plataforma de ELISA.Se realizará una búsqueda bibliográfica de la secuencia de IFNɣ de las especies de interés.Se diseñaran primers utilizando el programa Primers3Plus para evidenciar las regionescodificantes de IFN en diferentes especies. Hasta el momento se analizaron las secuenciascodificantes para la molécula de IFNɣ disponibles en el Gene Bank en un gran número deespecies animales y se observó un alto grado de conservación, por lo tanto, se dedujo que, enlas especies propuestas, la misma presenta poca variabilidad con respecto a las secuencias deIFNɣ conocidas. En base a esta premisa, diseñamos un par de primers capaces de amplificarla secuencia de interés mediante una reacción de PCR. Una vez confirmad a la recuperaciónde IFN en las especies de interés, el segmento amplificado será insertado en un vectorplasmídico. Con el vector resultante, se transformarán bacterias competentes E coli DH5α yse seleccionarán los clones recombinantes que posean el injerto por medio de colony-PCR.La producción de la proteína recombinante será evaluada en ensayos de Western Blot con unanticuerpo anti-histidina. Las proteínas expresadas serán purificadas, cuantificadas y seconservarán a -80°C, para ser inoculadas en el futuro en el modelo de llama. De confirmar elsupuesto de sensibilidad y especificidad de los primers diseñados para amplificar las regionescodificantes del IFN, se podrá detectar la presencia de IFNɣ en la sangre de un gran númerode especies, no solo en las anteriormente propuestas, sino también en otras de interésproductivo, como es el bovino. La creación de un kit diagnóstico Nacional contribuirá aincrementar la eficiencia del Plan Nacional de Control y Erradicación de la TBb y permitiráreducir costos.