CAPACIDAD INHIBITORIA DE METABOLITOS SECUNDARIOS DEL HONGO ENTOMOPATÓGENO Evlachovaea sp. SOBRE BIO-PELÍCULAS Y QUORUM SENSING DE Pseudomonas aeruginosa

D'ALMEIDA ROMINA ELISA; SUED NAHIR; ARENA MARIO E

Tafi Viejo

Jornada; II Jornadas de Microbiología sobre Temáticas Específicas del NOA; 2018

Asociación Argentina de Microbiología

El proceso de formación de las bio-películas bacterianas y numerosos factores virulentos que aseguran el éxito de las infecciones bacterianas están controlados por el sistema de comunicación bacteriana Quorum Sensing (QS). Éste es un mecanismo de señalización célula-célula que permite a las bacterias responder a una concentración crítica de moléculas que ellas mismas secretan (autoinductores) mediante la alteración de sus expresiones génicas. El desarrollo de estas bio-películas por bacterias patógenas humanas es responsable del 65% de las infecciones intrahospitalarias y del 90% de las infecciones crónicas que afectan la salud humana. Por lo tanto la inhibición de la formación de biofilm y de los mecanismos de QS puede ser una estrategia efectiva para controlar el crecimiento de bacterias que afecten la salud humana. Los Hongos Entomopatógenos (HE) sintetizan compuestos secundarios que compiten con la amplia biodiversidad de bacterias presentes en el insecto que infectan desencadenando un ataque químico para colonizarlo y degradarlo antes que las bacterias presentes en el mismo lo hagan, por lo que podrían resultar promisorios inhibidores del sistema de QS de bacterias patógenas humanas. En este trabajo se plantea estudiar el efecto inhibitorio de extractos del HE Evlachovaea sp, aislado del insecto plaga Spodoptera frugiperda (Brasil), obtenidos en diferentes condiciones de cultivo (presencia/ausencia restos de insecto; medios de cultivo: líquido/sólido), sobre la formación y disrupción de las bio-películas de Pseudomonas aeruginosa PAO1 y PA14, bacterias patógenas humanas; y sobre el mecanismo de QS de la cepa reportera Chromobacterium violaceum CV026. Los extractos del HE en presencia de insecto mostraron perfiles químicos más complejos que aquellos obtenidos del HE solo, tanto en el medio líquido como en el sólido. Estos extractos del HE-insecto también resultaron ser más activos en la inhibición de la formación del biofilm y disrupción del biofilm previamente formado de ambas cepas de Pseudomonas, respectivamente, en comparación con los extractos del HE solo. En el ensayo de inhibición de QS usando la cepa reportera CV026, los extractos del HE y HE-insecto inhibieron la producción de violaceína en las inmediaciones de la bacteria, indicando que sus metabolitos actuarían como inhibidores competitivos de la unión del autoinductor a sus sitios activos, impidiendo por lo tanto que se desencadene la síntesis de los factores de virulencia. En base a los datos obtenidos podemos concluir que: - Evlachovaea sp representa una promisoria fuente de metabolitos anti-biofilm de las cepas patógenas humanas Pseudomonas aeruginosa PAO1 y PA14, - el agregado de insectos al medio de cultivo del hongo induce la producción de metabolitos con actividad inhibitoria sobre los mecanismos de formación y disrupción del biofilm de P. aeruginosa PAO1 y PA14, - los extractos obtenidos del hongo en presencia del insecto inhiben el sistema de QS de C. violaceum CV026. Por todo lo expuesto se propone profundizar en el estudio de los metabolitos de Evlachovaea sp. como promisorios compuestos anti-virulentos sobre Pseudomonas aeruginosa.