Interacción entre el dermatán sulfato y el complejo de activación de la vía clásica del complemento humano C1

CALABRESE GRACIELA C.; MARANI MARIELA M.; INDUNI ANDREA S.; TUBIO ROSARIO; ALBERTO F.; RECONDO EDUARDO F.; FERNANDEZ DE RECONDO MARTA E.

Ciudad Autonoma de Buenos Aires, ARGENTINA

Otro; Reunión Cientrífica Departamento de Ciencias Biológicas; 2001

Dpto. de Ciencias Biológicas, Facultad de Farmacia y Bioquímica

Las cadenas polisacaridicas de dermatán sulfato se encuentran unidas a un esqueleto proteico constituyendo los proteoglicanos: decorina, biglicano y trombomodulina; actúa como anticoagulante inhibiendo a la trombina ya sea directamente a través del cofactor II de la heparina o bien indirectamente por activación de la proteína C. Nuestro grupo de trabajo ha descripto que bajo estrictas condiciones de trabajo la actividad anticoagulante y anticomplementaria de la heparina no fraccionada residen en la misma fracción del polisacárido. El objetivo del presente trabajo es caracterizar la interacción entre el DS y el primer complejo proteico de activación del sistema del complemento humano (Cl). El C1 se aisló de plasma humano por el método de Bing modificado y se purificó por cromatografia de afinidad con IgG agarosa. Se utilizó DS de máxima pureza (Syntex). La unión entre ambas macromoléculas se midió por la turbiedad desarrollada a 420 nm en 1 hora a 37°C bajo condiciones controladas (pH, relación DS/proteína, presencia de iones calcio y baja fuerza iónica). En todas las relaciones de DS/Cl estudiadas (1,2,5 y 10) en el precipitado de la interacción se separó una pequeña fracción de DS (11.10 % relaciones 1 y 2 y 5.50% relaciones 5 y 10) significativamente diferente (p<0.0l test de Dunett). Sobre estas fracciones se midio la actividad antitrombínica a través del sustrato cromogénico A-2383. Se ha encontrado que en condiciones controladas y sólo en presencia de calcio el DS también interacciona con el C1.