Solubilización de fosfatos por Trichoderma harzianum ITEM 3636 y su efecto en plantas de maní

GIORDANO FRANCISCO; TORRES ADRIANA; PASTOR NICOLAS; ROVERA MARISA; ERAZO JESSICA; REYNOSO MARIA

Jornada; XXXV Jornada Nacional de Maní; 2020

Colegio de Ingenieros Agrónomos de General Cabrera

IntroducciónEn la región manisera de la provincia de Córdoba (Argentina), los suelos son deficitarios en fósforo (P), principalmente porque dicho elemento se encuentra fijado en la fase sólida de los mismos en forma de fosfatos calcáreos insolubles (Bonadeo y Moreno, 2006). Por otra parte, las leguminosas necesitan un correcto suministro de P para lograr una adecuada fijación biológica del N 2 , proceso clave para el desarrollo del maní,siendo 10 ppm el nivel crítico para el cultivo (Freire, 1984).El género Trichoderma spp. comprende hongos filamentosos, avirulentos, altamente eficientes como promotores del crecimiento de las plantas. Algunas especies tienen la capacidad de aumentar la disponibilidad de nutrientes e incrementar el rendimiento de los cultivos. Uno de los mecanismos asociados a la promoción delcrecimiento vegetal es su capacidad de solubilizar fosfatos.Los objetivos de este trabajo fueron 1) determinar la capacidad de T. harzianum ITEM 3636 para solubilizarfosfato tricálcico, bajo condiciones in vitro y 2) analizar el efecto de T. harzianum ITEM 3636 sobre la absorciónde P en plantas de maní, bajo condiciones de invernadero.Materiales y MétodosEnsayo in vitro. Erlenmeyers conteniendo medio liquido NBRIP, adicionado con fosfato tricálcico, fueroninoculados con T. harzianum ITEM 3636 en activo crecimiento. La cuantificación de fosfato soluble se realizómediante espectrofotometría (600 nm), con mediciones cada 24 h, durante 9 días. La concentración de fosfatose expresó en mg-P/L. Asimismo, se midió diariamente la variación del pH del medio.Ensayo en invernadero. Semillas de maní ?curadas? (Dimension 2cm 3 .Kg -1 + Vitavax 2,5cm 3 .Kg -1 ) fueronrecubiertas con el bioinoculante a base de T. harzianum ITEM 3636 (5 x 10 6 conidios ml -1 ) utilizando CMC 2%como adherente. Las semillas se transfirieron a macetas plásticas conteniendo 1 kg de una mezcla estéril devermiculita y tierra (3:1), con bajo contenido de P (7 ppm). Se probaron ocho tratamientos:1) Semillas sininocular (control), 2) Semillas inoculadas con T. harzianum ITEM 3636, 3) Semillas sin inocular en sustratoadicionado con KH 2 PO 4 (fuente de fosfato soluble), 4) Semillas inoculadas en sustrato adicionado con KH 2 PO 4 ,5) Semillas sin inocular en sustrato adicionado con Ca 3 (PO 4 ) 2 (fuente de fosfato insoluble), 6) Semillasinoculadas en sustrato adicionado con Ca 3 (PO 4 ) 2 , 7) Semillas sin inocular en sustrato adicionado con KH 2 PO 4 yCa 3 (PO 4 ) 2 , 8) Semillas inoculadas en sustrato adicionado con KH 2 PO 4 y Ca 3 (PO 4 ) 2 . Las plantas se mantuvieronbajo condiciones de invernadero, (30-35°C día /15-20°C noche, 50% HR). Las macetas fueron regadasregularmente con agua estéril y, una vez por semana, fueron regadas con solución nutritiva de Hoagland, librede fósforo. Luego de 120 días post emergencia (estadío R4), se determinó el contenido de P en parte aéreamediante espectrofotometría. Se realizaron cinco réplicas para cada tratamiento.ResultadosEnsayo in vitro. Se observó un incremento significativo de fosfato solubilizado en medio inoculado con ITEM 3636, comparado con el control. El valor máximo (47,44 mg-P/L) se obtuvo a las 168 h. Los valores de pH del medio disminuyeron de 7.47 a6.7 a las 168 h (Fig.1) Ensayo en invernadero. A los 120 días postemergencia (Fig. 2), se encontró que lasplantas con mayor contenido de P fueronaquellas inoculadas con T. harzianumITEM 3636 y sembradas en sustratoadicionado únicamente con fosfatotricálcico (condición ?Ca 3 (PO 4 ) 2 ?). En estacondición, las plantas inoculadas (T6)presentaron un aumento significativo en elcontenido de P (11,9%), en comparacióncon las plantas de maní no inoculadas(T5).Por otro lado, en la condición ?KH 2 PO 4 ? (T3y T4), las plantas inoculadas con T.harzianum ITEM 3636 evidenciaron mayorcontenido de P con respecto a las plantasno inoculadas (incremento del 7,17%). Sinembargo, la diferencia entre ambostratamientos no fue significativa. En lacondición ?KH 2 PO 4 +Ca 3 (PO 4 ) 2 ? (T 7 y T8),se observó que tanto las plantasinoculadas como no inoculadas, mostraronniveles similares en contenido de P.Discusión y conclusiónA través de los ensayos de solubilizaciónde fosfato in vitro se ha demostrado que T.harzianum ITEM 3636 es capaz desolubilizar Ca 3 (PO 4 ) 2 . La baja disminucióndel pH indicaría que la solubilización podríadeberse la participación de enzimasfosfatasas y no a la producción de ácidos orgánicos.Como se ha mencionado anteriormente, en los suelos donde se realiza la siembra de maní, el fosfato seencuentra fuertemente fijado en formas insolubles de fosfatos calcáreos, no disponibles para la absorción de lasplantas. A partir del ensayo en invernadero, se ha encontrado que las plantas inoculadas con T. harzianumITEM 3636, sembradas en sustrato adicionado con fosfato tricálcico presentaban el mayor contenido de P.Estos resultados confirman que T. harzianum ITEM 3636 tiene la capacidad de solubilizar la fuente de fosfatoensayada y, además, que deja disponible el fosfato solubilizado para la absorción y utilización por las plantas demaní.El género Trichoderma es conocido por promover el crecimiento de las raíces de las plantas. En otros ensayos,hemos encontrado que T. harzianum ITEM 3636 incrementa la longitud y peso seco de las raíces de maní. Esteaumento en el área de la superficie de absorción, sumado a la capacidad de solubilizar fosfatos, podría permitirla mayor absorción de P en las plantas.Muchos estudios han indicado que la aplicación de microorganismos solubilizadores de fosfatos en distintoscultivos lograron aumentos en el contenido de P de las plantas, como así también, aumentos en los parámetrosde crecimiento de las mismas. La mayoría de los ensayos que evalúan el efecto de microorganismossolubilizadores de fosfatos en plantas de maní utilizan bacterias como microorganismos solubilizadores defosfatos (PSB).El presente estudio es el primer ensayo que demuestra la posible utilización de T. harzianum como potencialsolubilizador de fosfatos en plantas de maní. Por lo tanto, posiblemente, la utilización de un biofertilizante abase de T. harzianum, sólo o en combinación con distintas PSB, sería de gran interés para el desarrollo defertilizantes biológicos para el cultivo de maní en zonas agrícolas donde el P sea escaso.