Inmunosensor electroquímico para la detección del herbicida clomazoneusando fagos conjugados con puntos cuánticos de CdS

ZON, MARÍA ALICIA; ARÉVALO, FERNANDO JAVIER; DI TOCCO, AYLEN; FERNÁNDEZ, HÉCTOR; PORCAL, GABRIELA VALERIA; ROBLEDO, SEBASTIÁN NOEL

Santa Rosa La Pampa

Congreso; X Congreso Argentino de Química Analítica; 2019

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

Existe una fuerte demanda para el desarrollo de métodos de detección/cuantificación de diferentesanalitos en diversos campos. Así, se ha avanzado en el desarrollo de diferentes biosensores dondeel uso de un marcador adecuado puede conducir a un aumento de la sensibilidad y la selectividad.Una alternativa es emplear puntos cuánticos semiconductores como marcadores para desarrollarinmunosensores.1 Por otra parte, los bacteriófagos son una entidad biológica única que muestranuna excelente selectividad y se utilizan activamente en el desarrollo de nuevos biosensores. Se handesarrollado inmunosensores electroquímicos usando fagos como hapteno competidor y comoreconocedor del inmunocomplejo formado.2 El objetivo de este trabajo es desarrollar uninmunosensor electroquímico para la detección del herbicida clomazone usando fagos (fg)conjugados con puntos cuánticos de CdS (CdS QDot). El inmunosensor electroquímico propuestose basa en un inmunoensayo competitivo usando como hapteno competidor un fago conjugado conCdS QDot (fg-CdS QDot). La técnica electroquímica empleada para la detección del Cd2+ presenteen los CdS QDot fue la voltamperometría de onda cuadrada de redisolución anódica (VOCRA). Seestudiaron las condiciones de funcionalización de la superficie del electrodo de carbono vítreo (ECV)para la inmovilización del anticuerpo monoclonal anti-clomazone (mAb-clomazone), como tambiénlas condiciones de redisolución anódica electroquímica del Cd2+. Primero, se realizó lafuncionalización del ECV por electrografting de p-nitroanilina (PNA), a partir de una solución 3 mMPNA + 0,1 M LiClO4, mediante voltamperometría cíclica (VC) en el intervalo de potencial de 0 a 1,25V, a una velocidad de barrido (v) de 10 mV s-1. Posteriormente, el grupo sustituyente nitro fuereducido electroquímicamente por VC, en el intervalo de potencial entre 0,4 a -1,4 V, v = 100 mV s1, con el objetivo de formar grupos amino que permitan su unión covalente con el mAb-clomazone.Se determinó que con 3 ciclos de oxidación de la PNA y 10 ciclos sucesivos de reducción del gruponitro se logra una máxima formación superficial de grupos amino y una máxima corriente anódicade redisolución del Cd electrodepositado. Por otra parte, se estudiaron el potencial (Ed) y el tiempo(td) de deposición del Cd+2, que permitieron una mayor corriente de redisolución. Así, el Ed y el tdseleccionados fueron -0,95 V y 200 s, respectivamente. El inmunosensor electroquímico fueformado por inmovilización del mAb-clomazone, vía activación del anticuerpo con EDC/NHS. Porotra parte, los fg se conjugaron con CdS Qdot funcionalizados con grupos carboxilo (COOH) paraformar fg-CdS QDot. La presencia de clomazone se determinó en un ensayo competitivo con el fgCdS QDot. La etapa de detección se llevó a cabo por VOCRA en solución de HCl, 0,1 M, una vezformado el inmunocomplejo mAb-clomazone/fg-CdS QDots. Cada etapa de modificación delinmunosensor electroquímico fue verificada por espectroscopía de impedancia electroquímica.