Estudio de monocapas moleculares de Lagmuir-Blodgett como modelo de sistemas de administración de compuestos activos mediada por superficie

LUCIANA FERNÁNDEZ, GUSTAVO MORALES, MARISA SANTO, LUIS OTERO; A. BRACCA, E. LARGHI, T. KAUFMAN; D. HEREDIA, A.C. LIAUDAT,. BOSCH; ALUSTIZA, FABRISIO

Córdoba (sede de la webinar)

Congreso; 105a Reunión de la Asociación Física Argentina; 2020

Asociación Física Argentina

Las películas de Langmuir [ ] y Langmuir Blodgett [ ] formada por compuestos anfifílicos se estudian como modelos para analizar procesos de incorporación de compuestos activos en membranas celulares, como sistemas de adhesión y crecimiento celular. No obstante, hay pocos estudios utilizando películas monomoleculares de Langmuir-Blodgett que actúen como depósito de fármacos y sistemas de administración de droga. En el presente trabajo se reporta la generación de monocapas de Langmuir y Langmuir-Blodgett mixtas conteniendo un fosfolípido, un ácido graso y un compuesto activo para evaluar su potencial aplicación como sistemas de suministro de droga mediada por superficie. Como modelo de ácido graso se utilizó palmítico (AP) y como fosfolípido dipalmitoilfosfatidilcolina (DPPC), componentes lipídicos ampliamente utilizado para la elaboración de modelos de membranas celulares. Como principio activo se usó 2-metiltriclisina (Tr), de la familia de los alcaloides azafluorantenos, que fue patentado como agente cicatrizante [ ]. Se generaron y caracterizaron monocapas mixtas de DPPC-AP-Tr mediante la técnica de Langmuir, se determinaron las isotermas presión superficial-área y se analizó la reversibilidad y estabilidad de las monocapas.AP y DPPC forman una monocapa molecular mixta en la cual se encuentran intercaladas las moléculas de fármaco (Tr), constituyendo una película homogénea. AP es crucial en la monocapa y en concordancia con otros autores, sólo en una pequeña concentración provoca un efecto de compresión de las moléculas de DPPC que aumenta el empaquetamiento y mejora la estabilidad. A fin de comprender la organización adoptada en la interfase por los constituyentes de la monocapa, se determinaron el área molecular ocupada en el estado de máximo empaquetamiento y los módulos de compresión en monocapas mixtas de DPPC-AP y DPPC-AP-Tr. Asimismo, las monocapas fueron transferidas sobre mica a 25°C, mediante la técnica de Langmuir -Blodgett y se estudió su topografía por AFM observándose una película mixta compuesta por DPPC-AP-Tr ordenada y estable. Posteriormente estas superficies se evaluaron como soportes para el desarrollo de células. Se trabajó con líneas celulares 3T3 (fibroblastos murinos) y MRC-5 (fibroblastos humanos), se estudió la morfología celular, nuclear y la proliferación. La adhesión celular fue ideal sobre las superficies DPPC-AP-Tr, al compararlas con superficies de mica, DPPC-AP y poliestireno (control positivo de adhesión). El efecto proliferativo fue estadísticamente significativo, luego de 72 h de cultivo, DPPC-AP-Tr presentó un mayor número de célula/campo comparado a mica, DPPC-AP y poliestireno. Además, se observaron figuras mitóticas sobre DPPC-AP-Tr. El estímulo migratorio celular se evaluó por el ensayo de la herida y se registró el acortamiento del espesor de la misma luego de 5 h de cultivo. Los resultados obtenidos muestran un efecto biomimético que favorece la adhesión y proliferación celular sobre las superficies modificadas. El marcado efecto migratorio hallado en las células creciendo sobre DPPC-AP-Tr, indica su posible efecto tópico cicatrizante evidenciado mediante el acortamiento del espesor de la herida generada.