Gonadotrofina Coriónica (hCG) ADN recombinante y urinaria altamente purificada. Identificación de isoformas por isoelectroenfoque (IEF).

BEATRIZ N. GIAMPAOLO; HERNÁN M. DI NUCCI; MARÍA PERASSOLO; PAULA L. CODÓ; MARIANA MALVICINI; MARÍA E. ALBERTENGO

Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina

Jornada; X Congreso Argentino de Farmacia y Bioquímica Industrial/ VIII Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial; 2005

LA GONADOTROFINA CORIÓNICA HUMANA (HCG) PERTENECE A UNA FAMILIA DE HORMONAS GLICOPROTEICAS SUMAMENTE HETEROGÉNEAS COMO SON LH, FSH Y TSH DADO QUE  POSEEN MÁS DE UN 30% DE HIDRATOS DE CARBONO EN SU COMPOSICIÓN. EL ALTO GRADO DE PURIFICACIÓN DE LA HORMONA, OBTENIDA POR TECNOLOGÍA DE ADN RECOMBINANTE O POR EXTRACCIÓN DE ORINA DE MUJERES EMBARAZADAS, HACE QUE LAS NORMATIVAS INTERNACIONALES INDIQUEN EN EL CONTROL DE CALIDAD LA IDENTIFICACIÓN DE LAS DISTINTAS ISOFORMAS QUE LA COMPONEN, SU DISTRIBUCIÓN Y PROPORCIÓN. EL ISOELECTROENFOQUE (IEF) ES UNO DE LOS MÉTODOS RECOMENDADOS, Y ES NUESTRO OBJETIVO ENCONTRAR LAS CONDICIONES TÉCNICAS PARA APLICARLO AL CONTROL DE MATERIAS PRIMAS Y PRODUCTOS TERMINADOS. SE REALIZÓ LA TÉCNICA DE IEF SOBRE MATERIA PRIMA DE HCG URINARIA ALTAMENTE PURIFICADA (M1) Y PRODUCTO TERMINADO HCG OBTENIDO POR TECNOLOGÍA DE ADN-RECOMBINATE HUMANO (M2). EN  AGUA CALIDAD INYECTABLE SE DISOLVIERON  EL POLVO DE M1 Y  LOS LIOFILIZADOS DE  M2  EN 100ΜL, CONCENTRADO Y  DESALINIZADO PREVIAMENTE  CON MEMBRANAS DE EXCLUSIÓN MOLECULAR  DE CUTOFF 10.000 CON LAVADOS CON TWEEN 20. SE REALIZARON ENSAYOS PRELIMINARES Y SE PROBARON DOS TINCIONES: COOMASSIE BLUE Y ARGÉNTICA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS PERMITEN CONCLUIR QUE EL  MÉTODO DE IEF RESULTA CONFIABLE APLICADO A LA IDENTIFICACIÓN DE ISOFORMAS DE  MP Y MUESTRAS DE PT, PREVIAMENTE CONCENTRADAS Y DESALINIZADAS, EMPLEANDO FIJACIÓN ÁCIDA Y LAVADO EXHAUSTIVO PREVIAMENTE A LA TINCIÓN ARGÉNTICA.