Hormona Folículo estimulante (FSH). Identificación de isoformas de Folitropina (ADN recombinante humana) y Urofolitropina por isoelectroenfoque (IEF).

BEATRIZ N. GIAMPAOLO; MARÍA PERASSOLO; PAULA L. CODÓ; ESTEBAN M. REPETTO; HERNÁN M. DI NUCCI; ANDREA CUSTIDIANO; MARÍA E. ALBERTENGO

Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Argentina

Jornada; X Congreso Argentino de Farmacia y Bioquímica Industrial/ VIII Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial.; 2005

Las nuevas especialidades medicinales de hormona folículo estimulante (FSH) contienen ingredientes activos como Folitropina obtenida por tecnología de ADN recombinante y Urofolitropina altamente purificada, extraída de orina de mujeres menopáusicas. Al igual que otras gonadotrofinas, la FSH es una  proteína altamente glicosilada, con una composición característica de  isoformas  según la fuente productiva, que permite identificarla y así mismo predecir su actividad biológica y su biodisponibilidad. El objetivo de este trabajo es identificar las isoformas en materia prima (MP) y producto terminado (PT) utilizando el método de isoelectroenfoque, que es  aplicado al análisis de otras glicoproteínas como HCG (gonadotrofina coriónica humana) y EPO (eritropoyetina). Se realizó la técnica de IEF sobre  Materia prima de  Urofolitropina  altamente purificada, en polvo (M1) y productos terminados multidosis  de Folitropina liofilizado (M2) y en solución (M3).Las muestras se prepararon de la siguiente manera: en  agua calidad inyectable, se disolvieron  M1 y uno a dos viales de  liofilizado M2. Las muestras M2 y M3 fueron concentradas y desalinizadas utilizando tubos cónicos de polipropileno que contienen membranas de exclusión molecular de cutoff 10.000, centrifugando, lavando con agua calidad inyectable y luego con Tween 20 al 2%. Se probaron dos tinciones: Coomassie Blue y argéntica. Los resultados obtenidos permiten concluir que el método resulta confiable para la identificación de isoformas de FSH en las condiciones de tinción argéntica descriptas, con el lavado exhaustivo.  En PT la reproducibilidad en la identificación de las isoformas de menor proporción podría afectarse por la deficiencia en la recuperación, con lo cual sería conveniente para un futuro trabajo aumentar el cutt-off para evitar la pérdida de otras  isoformas.