Estimulación de cascadas mitogénicas en células intestinales por PTH y 1,25(OH)-vitamina D3

BUZZI, NATALIA SOL; GONZALES PARDO, VERÓNICA; RICARDO BOLAND,; RUSSO DE BOLAND, ANA

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; XXII Reunión Anual de la Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral; 2005

Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral (AAOMM)

ESTIMULACION DE CASCADAS MITOGENICAS EN CELULAS INTESTINALES POR PTH Y 1,25(OH)2-VITAMINA D3 Natalia Buzzi, Verónica Gonzalez Pardo, Ricardo Boland y Ana Russo de Boland. Depto. Biología, Bioquímica y Farmacia. Universidad Nacional del Sur. 8000 Bahia Blanca. Previamente demostramos que la hormona paratiroidea (PTH) y la hormona esteroidal 1,25(OH)2-vitamina D3 [1,25(OH)2D3] activan a la tirosina quinasa citosólica c-Src en células intestinales (enterocitos) de rata, la cual, a su vez participa en la fosforilación y activación de las MAP quinasas ERK1 y ERK2. En células de mamíferos se han identificado tres familias de MAP quinasas: ERK1/2, JNK1/2 y las p38 MAPKs. Las tres familias de MAP kinasas son activadas por quinasas (MAP quinasa quinasas) de especificidad dual, que las fosforilan en residuos de tirosina y treonina. En este trabajo investigamos si estas hormonas son capaces de activar a otros miembros de la familia de MAP quinasas. Nuestros resultados demuestran que el 1,25(OH)2D3 induce la fosforilación y activación de p38 MAPK en enterocitos de rata. La respuesta depende del tiempo y de la dosis, con efectos máximos a 2 min (+ 300%) y a 1nM. Contrariamente a la hormona esteroidal, PTH disminuye, dentro de los 15-30 min, la fosforilación y actividad basal de p38 MAPK. La fosforilación de p38 MAPK-dependiente de 1,25(OH)2D3 es suprimida por el inhibidor selectivo de esta quinasa, SB 203580. La quelación del Ca2+ extracelular con EGTA, la inhibición de c-Src con PP1 o la inhibición de la proteina quinasa A (PKA) con Rp-cAMP, atenúan los efectos de la hormona. La estimulación de los enterocitos con 1,25(OH)2D3 (1 nM) o PTH (10 nM) también provoca la fosforilación y activación de JNK1/2. El efecto de ambas hormonas sobre JNK1/2 es transiente, siendo máxima la respuesta a 1 min (+200%) y 2 min (+300%) para 1,25(OH)2D3 y PTH , respectivamente. El tratamiento con 1,25(OH)2D3 resulta en una rápida inducción de la expresión de c-Fos (+100%, 5 min), la que es bloqueada por SB 203580 y parcialmente suprimida por el inhibidor de ERK1/2, PD 98059, mientras que el tratamiento con PTH no modifica los niveles de la oncoproteína. Los resultados de este trabajo sugieren que PTH y 1,25(OH)2D3 regulan diferencialmente las cascadas de p38 MAPK y JNK1/2 en células intestinales y que p38 MAPK desempeña un rol central en la inducción de la oncoproteína c-Fos por el 1,25(OH)2D3, demostrando que los efectos rápidos de esta hormona, que se manifiestan en segundos-minutos, inducen la regulación secundaria de genes que resultan en los efectos genómicos