Rol de BCL2 en el Linfoma de Hodgkin clásico refractario y recaído. Potencial beneficio del uso de venetoclax.

GAMBOA-CEDEÑO, ANGÉLICA; DOROTEA FANTL; ROJAS-BILBAO, ERICA; NUÑEZ, MYRIAM; OTERO, VICTORIA; CUGLIARI, SILVANA; GARCÍA RIVELLO, HERNÁN; RANUNCOLO, STELLA MARIS; SCHUTZ, NATALIA; MARTA E. ZERGA; JAUK, FEDERICO

Mendoza

Congreso; XXIV Congreso Argentino de Hematología. IV Simposio Educacional Conjunto EHA-SAH. HOPE LA Highlights of Past EHA Latin America. X Congreso del Grupo Rioplatense de Citometría de Flujo.; 2019

Sociedad Argentina de Hematología (SAH)

Los pacientes con Linfoma de Hodgkin clásico (cLH) pueden alcanzar una sobrevida prolongada en el 70-80% de los casos diagnosticados en estadios iniciales, reduciéndose a un 60% en estadios avanzados. Sin embargo, un 20 a 30% de los pacientes es refractario o recae. En la actualidad, el trasplante autólogo de células madre hematopoyéticas, resulta exitoso en el 50% de los pacientes refractarios y recaídos con una sobrevida global promedio de dos años.En estudios previos demostramos que la señalización constitutiva de RelB y NIK (Kinasa Inductora de NFkB), mediadores de la vía alternativa de NFKB, tiene un rol importante en la sobrevida del cLH. Entre otros genes blanco, RelB regula BCL2, manteniendo elevados niveles de expresión. La depleción de RelB, mediante shRNAs o la inhibición farmacológica de la actividad enzimática de NIK, inducen muerte de las células tumorales. Estos resultados, obtenidos a partir de líneas celulares establecidas de pacientes progresados, sugerían que alteraciones en la vía alternativa de NFkB, podrían contribuir a la refractariedad y la recaída en algunos pacientes con cLH. En estos momentos no se dispone de marcadores capaces de identificar al diagnóstico a pacientes refractarios o en riesgo de recaída. Nuestro objetivo fue analizar si mediadores de la vía alternativa de NFkB y uno de sus genes blanco podrían ser utilizados como marcadores de pronóstico en cLH. Posteriormente evaluar si estos factores representan potenciales blancos de terapias dirigidas en pacientes refractarios y recaídos.Analizamos la expresión de NIK y de BCL2, mediante inmunohistoquímica en 113 biopsias de ganglio linfático de pacientes con cLH naive de tratamiento [52 mujeres Md (rango) de edad 36 (6-88) y 61 hombres 40.7 (9-78)]. Evaluamos la tinción citoplasmática en la célula de Hodgkin-Reed Sternberg (HRS), célula neoplásica maligna distintiva de este linfoma. El análisis univariado no mostró correlación entre la expresión de NIK o de BCL2 y distintos parámetro de pronóstico clínicos y de anatomía patológica. Confirmando lo observado en estudios in vitro, respecto de la regulación de BCL2 por RelB en líneas celulares humanas de cLH mediante ChIP (Inmunoprecipitación de Cromatina) y de ChIP-Seq (Secuenciación de fragmentos de cromatina inmunoprecipitados), se encontró una correlación directa entre la expresión de ambas moléculas en las biopsias evaluadas (p=0.01). El estudio de supervivencia, mediante las Curvas de Kaplan-Meir, demostró que aquellos pacientes con más de un 60% de células HRS positivas para la expresión de BCL2 presentaron períodos libre de enfermedad (SLE) más cortos [Log Rank Test (Mantel Cox) p=0.002] y una menor sobrevida global (SG) [Log Rank Test (Mantel Cox) p=0.02]. La expresión de NIK no mostró valor pronóstico. La significancia estadística se mantuvo al realizar el estudio de Regresión de Cox (p=0.01), arrojando la Regresión Logística, resultados similares (p=0.01). Todas las líneas celulares humanas de cLH evaluadas (L1236, U-H01, KM-H2, SPDH1 y L540) resultaron sensibles al tratamiento con venetoclax, un bloqueante específico de BCL2. La única línea celular tratada que no mostró sensibilidad a esta droga fue HD-M2 que no expresa BCL2. La evaluación de los efectos de esta droga mostró alteraciones del ciclo celular, específicamente un arresto en la Fase S, cuando se compara la línea en su estado wild type, la tratada con el vehículo y la tratada con venetoclax. Concluimos que la determinación de la expresión de BCL2 a nivel tisular al momento del diagnóstico proporciona información importante sobre la respuesta al tratamiento convencional, la SLE y la SG en pacientes con cLH. Los resultados del tratamiento con venetoclax son altamente promisorios. Nuestros resultados sugieren la posibilidad de indicar un bloqueante de BCL2 en aquellos casos de cLH en los cuales se determine en la biopsia de ganglio linfático al diagnóstico primario la expresión de BCL2 en ≥60% de las células de HRS.