CONFORMACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE PANELES DE SUEROS BOVINOS PARA EVALUACIÓN Y MONITOREO DE PARÁMETROS DE DESEMPEÑO EN ENSAYOS INMUNOENZIMÁTICOS PARA LA VIGILANCIA ACTIVA DE FIEBRE AFTOSA

ERICA DE CONTI; EDUARDO MARADEI; GABRIELA MADDONNI; INGRID BERGMANN; MARCOS PEREZ VISÑUK; ANDREA PEDEMONTE; VIVIANA MALIRAT

CIUDAD AUTÓNOMA DE BUENOS AIRES

Jornada; IX JORNADAS DE JÓVENES INVESTIGADORES; 2019

FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS - UBA

La FA es una de las enfermedades más importantes de los animales domésticos biungulados que genera grandes pérdidas económicas en países afectados, siendo de notificación obligatoria ante la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE). Esta enfermedad viral es altamente contagiosa y de rápida difusión, particularmente durante la fase subclínica/aguda. Su capacidad de establecer infección persistente, inclusive en animales vacunados, es relevante para el establecimiento de medidas de control. Argentina es reconocida internacionalmente por la OIE como libre de FA sin/con vacunación. El mantenimiento del status de este último requiere de muestreos serológicos que demuestren fehacientemente la ausencia de actividad viral, independientemente del estado de vacunación y/o serotipo involucrado, mediante pruebas basadas en la detección de anticuerpos contra proteínas no capsidales (PNC) del virus. En este contexto, hemos desarrollado y validado un test ELISA indirecto que detecta anticuerpos contra la PNC 3ABC (I-ELISA ABC). En este trabajo se describe la constitución y caracterización de estándares de referencia para dicha prueba que: monitoreen el mantenimiento del desempeño; verifiquen el desempeño lote a lote y en nuevos ensayos; y sean referencia para otros laboratorios. A partir de colecciones de sueros del SENASA se seleccionaron aquellos animales infectados en forma experimental/natural, y de áreas libres sin/con vacunación. Sueros con características deseables y volumen suficiente fueron identificados para constituir y caracterizar 3 paneles de evaluación:-Panel Bovino: 3 sueros (negativo, débil y fuerte positivo) para calibración y sensibilidad analítica (ASe).-Panel de Sensibilidad: 25 sueros con amplio espectro de reactividades, origen, etc., para calibración/establecimiento/comparación de sensibilidad diagnóstica (DSe), repetibilidad/reproducibilidad.-Panel de Especificidad: 1000 sueros de áreas libres sin/con vacunación con distintos valores por debajo del punto de corte, para especificidad diagnóstica (DSp).Los sueros fueron analizados en el ensayo I-ELISA 3ABC validado (ver poster de De Conti y col.) y en otros ensayos que permitieron completar su caracterización (Virus neutralización, ELISA para proteínas capsidales). Se establecieron sus valores de referencia y parámetros de repetibilidad/reproducibilidad/homogeneidad/estabilidad. Se acondicionaron y alicuotaron y se aplicaron en estudios de control de calidad de proceso y producto final, en estudios de mantenimiento del desempeño del test en diferentes lotes y en estudios de desempeño comparativo de diferentes kits de I-ELISA 3ABC, demostrando así su adecuación/idoneidad para su uso como paneles de referencia.