VALIDACIÓN DE UN MÉTODO INMUNOENZIMÁTICO ELISA INDIRECTO PARA DETECCIÓN DE ANTICUERPOS CONTRA LA POLIPROTEÍNA 3ABC DEL VIRUS DE LA FIEBRE AFTOSA

MARCOS PEREZ VISÑUK; EDUARDO MARADEI; GABRIELA MADDONNI; VIVIANA MALIRAT; ERICA DE CONTI; ANDREA PEDEMONTE; INGRID BERGMANN

CIUDAD AUTÓNOMA DE BUENOS AIRES

Jornada; IX JORNADAS DE JÓVENES INVESTIGADORES; 2019

FACULTAD DE CIENCIAS VETERINARIAS - UBA

La FA, enfermedad de notificación obligatoria ante la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE), afecta a animales biungulados y genera grandes pérdidas económicas en los países afectados. La misma es causada por el virus de la FA (VFA), y en fase subclínica/aguda presenta una alta tasa de contagio y rápida difusión. Una característica importante es la capacidad de establecer infección persistente, inclusive en animales vacunados, cuya relevancia epidemiológica aún es controvertida. Argentina es reconocida internacionalmente por la OIE como libre de FA sin/con vacunación. El mantenimiento del status de este último requiere de muestreos serológicos que demuestren fehacientemente la ausencia de actividad viral, independientemente del estado de vacunación y/o serotipo involucrado, mediante pruebas basadas en la detección de anticuerpos contra proteínas no capsidales (PNC) del VFA. En este trabajo se describe la validación de un test inmunoenzimático ELISA indirecto que detecta anticuerpos contra la PNC 3ABC siguiendo las 4 etapas recomendadas por la OIE. La fase 1 de validación incluyó la sensibilidad analítica evaluada con sueros de animales infectados. La sensibilidad diagnóstica (DSe), (fase 2), se evaluó con sueros verdaderos positivos de animales infectados experimentalmente/campo, con/sin vacunación previa, alcanzando un valor de 99,4% o de 100%, cuando se incluyeron sueros de categoría sospechoso; para la especificidad diagnóstica se emplearon sueros de animales vírgenes alcanzando un valor de 98,1% y 98,2% en animales negativos vacunados. La repetibilidad (fase 3) se evaluó a partir de 3 sueros de diferente grado de reactividad en 32 pruebas independientes con resultados satisfactorios inclusive cuando se evaluaron muestras débilmente positivas, siendo los coeficientes de variación intra/inter-ensayo menores a 10% y 20%, respectivamente. Asimismo, la reproducibilidad evaluada preliminarmente en un laboratorio adicional resultó satisfactoria. Al aplicarse el test sobre sueros de muestreo del programa de vigilancia seroepidemiológica (fase 4), la distribución de frecuencias y perfiles de reactividad resultaron dentro de valores esperados: 97,1% negativos, 0,8% sospechosos, 2,1% positivos. Al comparar con un panel de referencia internacional, se obtuvieron resultados satisfactorios particularmente de DSe, mostrando su viabilidad para incluir dicho test como prueba de referencia. Se concluye que el mismo cumplió positivamente con las 4 etapas, logrando resultados de sensibilidad, especificidad, repetibilidad y reproducibilidad apropiados, estableciendo su potencial para ser considerado como prueba de referencia en estudios de ausencia de circulación viral de FA, independientemente del estado de vacunación.