CEVHAN   27013
CENTRO DE VIROLOGIA HUMANA Y ANIMAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
DESARROLLO DE UN VECTOR ADENOVIRAL OPTIMIZADO COMO CANDIDATO VACUNAL CONTRA LA FIEBRE AFTOSA
Autor/es:
ZIRALDO, M; PERIOLO O; D'ANTUONO A; SEKI, C; MATTION, N; BIDART, J; ZAMORANO P
Reunión:
Jornada; IX Jornadas de Jóvenes Investigadores - 2019; 2019
Resumen:
La fiebre aftosa (FA) es una enfermedad causada por el virus de la Fiebre Aftosa (VFA), queafecta a especies de interés pecuario. Dada las graves implicaciones comerciales para el paísafectado, la FA es considerada por la Organización Mundial de Sanidad Animal como laprincipal enfermedad animal de declaración obligatoria. Amplia evidencia internacionalsustenta la necesidad de desarrollar candidatos vacunales que induzcan una respuesta inmuneeficaz y duradera contra los diferentes serotipos del VFA y que no estén basados en el cultivodel VFA infectivo. Una estrategia que ha demostrado ser exitosa es el empleo de plataformasbasadas en el adenovirus recombinante humano tipo 5 (Ad). Nuestro laboratorio generó elAd-P12A3C que dirige la expresión de las proteínas estructurales y la proteasa viral 3C delVFA cepa O1 Campos. La inmunización con este candidato, en modelo murino, no protegióa los animales frente al desafío viral. El objetivo de este trabajo es optimizar estos vectoresadenovirales para que induzcan inmunidad protectora, al menos contra el desafío homólogo,como ocurre con la vacuna inactivada de uso actual. Con este fin se generó el vector AdP12A3COPcon el objetivo de expresar mayores niveles de subunidades del VFA O1Campos.El nuevo candidato contiene la unidad transcripcional heteróloga (cassette P12A3C)insertada en sentido opuesto respecto al genoma adenoviral y bajo el control del promotorCMV optimizado. Por medio de análisis por Western blot y ELISA se determinó que losniveles de acumulación de proteínas del VFA, en extractos citoplasmáticos totales de célulasHEK293A infectadas con el vector modificado Ad-P12A3COP, fueron 15 veces superioresrespecto a aquellas infectadas con el vector anterior Ad-P12A3C. Las subunidades del VFAgeneradas fueron reconocidas por un panel de sueros de bovinos vacunados, sugiriendo quelos determinantes antigénicos se expondrían en una conformación similar a la del virusnativo. El vector Ad-P12A3COP se evaluó en pruebas de inmunogenicidad y desafío en unmodelo murino. Los resultados obtenidos demostraron que ratones inoculados con dos dosisde Ad-P12A3COP alcanzaron un título de anticuerpos específicos 10 veces superior al delgrupo inoculado con Ad-P12A3C. Más aún, el 70% de los ratones inoculados con el vectorAd-P12A3COP fueron protegidos ante el desafío viral homólogo. En conclusión, lasmodificaciones introducidas, inversión del cassette heterólogo que codifica las proteínas delVFA y la optimización del promotor, permitieron en esta primera etapa, desarrollar un vectorcapaz de aumentar significativamente el nivel de expresión de las proteínas viralescapsidales, resultando ser un candidato vacunal más inmunogénico y capaz de aportarprotección frente al desafío con virus vivo de la cepa O1 Campos, en un modelo murino.