Producción de óxido nítrico en ganglios anexos a la raíz dorsal y médula espinal lumbar luego de la axotomía del nervio ciático de la rata

M.F. CORONEL; P.L. MUSOLINO; M.J. VILLAR

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; Congreso Conjunto de Sociedades Biomédicas; 2004

Sociedades Biomédicas de Argentina

Se ha comprobado recientemente que el óxido nítrico (NO) participa en la neurotransmisión nociceptiva y se han observado variaciones en la expresión y actividad de la isoforma neuronal de la sintasa del óxido nítrico (NOSn), así como en los niveles de su mRNA, en diversos modelos de daño neuropático.  El objetivo del presente trabajo fue monitorear la producción de NO en ganglios anexos a la raíz dorsal (GARDs) y médula espinal (ME) lumbar en un modelo de neuropatía periférica, y correlacionarla con la expresión de la enzima NOSn en los mismos tejidos. Los animales (ratas macho Sprague-Dawley) fueron sometidos a axotomía de su nervio ciático y sacrificados luego de diferentes tiempos de sobrevida (1, 7, 14 y 28 días), se disecaron y homogeneizaron los ganglios L4-5 ipsi y contralaterales y la ME lumbar en un buffer Tris-ClH 20mM (pH=7,4) con sacarosa 0.32M y EDTA 2mM. Los homogenatos se centrifugaron a 10000 X g por 10 min a 4°C. En los sobrenadantes, la producción de NO fue evaluada mediante la determinación de nitritos y nitratos (NOx), productos de oxidación del NO, usando el NO Analyser 280 (Sievers). Se procesaron asimismo ganglios y médulas de ratas controles. Paralelamente, se perfundieron animales axotomizados y los tejidos fijados fueron procesados para inmunohistoquímica convencional, utilizando un anticuerpo específico para NOSn. Se observó un aumento progresivo de los niveles de NOx tanto en ganglios como en el asta dorsal ipsilateral de la médula espinal. El patrón temporal de aumento de los niveles de NOx fue paralelo al de aumento en la inmunoreactividad de nNOS: gradual pero sin significancia estadística en animales con 7 días de sobrevida, más marcado a los 14 días (p<0.001), alcanzándose un pico a los 28 días luego de producida la lesión (p<0.001). Estos resultados comprueban la participación del NO en la neurotransmisión del dolor neuropático. Queda por demostrar si este mensajero gaseoso juega un rol pro o antinociceptivo.