Ensayo de susceptibilidad a Metronidazol en aislamientos de T. foetus por citometra de ujo

LUQUE ME; LUNA BE; ABDALA ME; CARRANZA PG; RIVERO MB; DI LULLO D; RIVERO FD

Resistencia

Congreso; XXX Reunión de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2018

La Tricomonosis Bovina, enfermedad parasitaria del tracto urogenital bovino, es causada por el protozoario flagelado Tritrichomonas foetus (T. foetus). Se disemina por transmisión sexual y representa un problema sanitario cuando se utiliza el servicio natural como método reproductivo. La patología ocasiona grandes pérdidas económicas debido a la disminución de la tasa de preñez por infertilidad transitoria o la presencia de abortos. La terapia con fármacos no siempre es aconsejable debido al reporte de fallas en el tratamiento y a la aparición de resistencias (aeróbicas in vivo y anaeróbicas in vitro), por lo que se opta por la faena del animal infectado. La droga más utilizada es el Metronidazol (Mz) y sus derivados. La susceptibilidad a Mz en este protozoario ha sido investigada mediante metodologías que se basan en la observación de la movilidad del parásito a través del microscopio óptico luego ser sometidos al efecto de la droga; siendo técnicas laboriosas, lentas y subjetivas. Hasta la fecha no se han reportado valores de IC50 (mitad -50%- de la concentración inhibidora mínima) a las 48 hs para Mz en T. foetus. La citometría de flujo es un método eficiente, rápido y sensible que permite la automatización de la técnica y aumenta la objetividad. El objetivo del trabajo fue obtener valores de IC50 de Mz a las 48 hs in vitro bajo dos condiciones diferentes (anaerobiosis (ANC) y aerobiosis (AC)). Para ello se incubaron 6 aislamientos de T. foetus con concentraciones seriadas de Mz durante 48hs en aerobiosis y en bolsas para anaerobiosis por triplicado. Finalizado ese período se marcaron con FDA (di acetato de fluoresceína), para observar los parásitos vivos, y luego fueron contados utilizando un citómetro de flujo. Los resultados obtenidos fueron de 1,06 a 1,25 µM en ANC y de 1,44 a 3,03 µM en AC y representan los únicos valores de IC50 reportados en este protozoario a las 48 hs. además, la citometría de flujo demostró ser una técnica eficaz, rápida y útil para realizar ensayos cuantitativos de susceptibilidad en estos protozoarios. Esta información resulta importante para la planificación de tratamientos, teniendo en cuenta la variabilidad biológica de los aislamientos de este parásito, y constituye una herramienta fundamental para el control de la enfermedad