BRCA1 REGULA LA TRANSCRIPCIÓN DE ATAXIA TELANGIECTASIA MUTADA (ATM) EN EL CÁNCER DE PRÓSTATA.

MOIOLA C; DE LUCA P; COTIGNOLA J; VAZQUEZ E; DE SIERVI A

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica.; 2010

Sociedad Argentina de Investigación ( SAIC)

La acumulación de alteraciones en oncogenes y genes supresores de tumores, así como la disfunción de aquellos de respuesta al daño en el ADN (DDR), son característicos de la carcinogénesis y factores importantes en la patogénesis de tumores malignos. ATM es una quinasa que participa principalmente en la DDR y el control del ciclo celular mediante la activación por fosforilación de diversas proteínas. En próstata los polimorfismos de ATM se consideran un factor de riesgo para contraer cáncer y este riesgo se ve incrementado en individuos portadores de mutaciones en BRCA1. Debido al rol de ATM en la progresión del PCa, nuestro objetivo fue estudiar su regulación transcripcional en líneas tumorales de próstata. Mediante ensayos de ChIP-scanning, genes reporteros y RT-qPCR, demostramos que BRCA1 participa en la regulación transcripcional de ATM. Identificamos que BRCA1 se asocia al promotor de ATM y su sobre-expresión conduce a un aumento en la actividad transcripcional y en los niveles del ARNm de este gen. Utilizando un plásmido de expresión de BRCA1 con el dominio C-terminal (BRCT) mutado, comprobamos la perdida de  esta regulación indicando la importancia del mismo en dicho mecanismo. Mediante análisis por Western blot encontramos que BRCA1 induce la expresión de ATM y su función, detectada por el incremento en el estado de fosforilación de la histona 2 (H2AX). Debido a que es ampliamente conocido que ATM fosforila a BRCA1, investigamos si la transcripción de ATM es mediada por un mecanismo regulatorio que involucra a estas dos proteínas. Utilizando un inhibidor de la actividad quinasa de ATM (KU-55933), observamos que en presencia de BRCA1 existe una disminución de la actividad transcripcional del promotor, sugiriendo que la regulación de estas proteínas podría ser a través de un "loop" regulatorio. Estos resultados ponen de manifiesto el rol fundamental de BRCA1 como regulador de la transcripción y su papel clave en el mantenimiento de la homeostasis celular.