Regulación de la expresión de ciclooxigenasa-2 por señales de calcio en estroma uterino

CANELLADA A.; URTENECHE I.; SACERDOTI F.; DE LEÓN R.; GENTILE T.

Mar del Plata, Buenos Aires, Argentina

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentna de Inmunología; 2009

Sociedad Argentina de Inmunología, Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La expresión de ciclooxigenasa-2 (COX-2) puede regularse por calcineurina (Cn) /NFAT en distintos tipos celulares. Esta ruta puede bloquearse con inhibidores de Cn, como ciclosporina A (CsA). Nos propusimos estudiar si la ruta Cn/NFAT puede activarse en estroma uterino y si puede regular la transcripción y expresión de COX-2 (marcador de receptividad uterina) durante la ventana de implantación. MÉTODOS: Se cultivaron células estromales aisladas de útero de ratas a los días 0 y  4 de gestación. La pureza de los cultivos se analizó por inmunodetección de citoqueratina y vimentina. A los 7 días de cultivo  las células se estimularon o no durante 1h con: PMA+Ionomicina (PIo), Angiotensina II (Ang), con y sin pretratamiento con CsA. Se analizó por western blot e inmunofluorescencia la expresión y localización intracelular de NFATc1. La expresión de COX-2 fue analizada mediante RT-PCR y western blot en extractos de las células estimuladas in vitro durante 4 u 8 horas. RESULTADOS: Detectamos la expresión de NFATc1 en estroma uterino.  NFATc1 se traslocó al núcleo celular en respuesta al estímulo con PIo, y dicha traslocación se inhibió con CsA. La transcripción de ARNm de COX-2 se indujo por PIo y, de modo Cn dependiente, por Ang, en útero de rata no gestante y a los 4 días de gestación. Sin embargo, por western blot se observó la inducción de la expresión de la proteína COX-2 únicamente a los 4 días de gestación, expresión que no se incrementó cuando las células fueron estimuladas, ni se inhibió con CsA. CONCLUSIONES: La ruta Cn/NFAT se activa por señales de calcio en útero de rata. La transcripción del ARNm de COX-2 en estroma puede inducirse por estímulos que incrementan los niveles de calcio intracelular, de manera dependiente de Cn. La falta de correlación entre la transcripción de ARNm y la expresión de COX-2 podría deberse a la existencia de mecanismos post-traduccionales de estabilización de la proteína, independientes de Cn.