Enfoque farmacogenómico para el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas para el Hepatocarcinoma basadas en la inhibición de vías epigenéticas.

GUILLERMO MAZZOLINI; ALEJANDRINA REAL; MARIANA GARCIA; ESTEBAN FIORE; MARCELO RODRIGUEZ; JUAN BAYO

Buenos Aires

Congreso; Congreso Argentina de Hepatología; 2017

Asociación Argentina de Hepatología

El hepatocarcinoma (HCC) avanzado es un problema de salud pública por lo que se requieren nuevas estrategias terapéuticas. El proceso hepatocarcinogénico resulta de alteraciones tanto genéticas como epigenéticas. En particular, desregulaciones en distintas enzimas epigenéticas afectan la accesibilidad del ADN afectando la transcripción, reparación y la replicación celular. El objetivo de este trabajo es estudiar la presencia de enzimas epigenéticas y su posible correlación con el pronóstico de pacientes con HCC, con el fin de identificar nuevos blancos terapéuticos. La correlación de la sobrevida de pacientes con HCC con los niveles de expresión de enzimas epigenéticas se analizó utilizando datos clínicos y de RNA-seq de la base de datos pública TCGA (n=373). A través del análisis particular de 97 enzimas epigenéticas encontramos que niveles elevados de las demetilasas de histonas KDM5B, LSD-1 y de la metiltransferasa de histonas EZH2 se correlacionan con un peor pronóstico. Además, en ensayos de viabilidad in vitro sobre 7 líneas celulares de HCC evaluamos los efectos terapéuticos de 3 inhibidores específicos para KDM5B (JIB-04), para LSD-1 (GSK-LSD1) y para EZH2 (DZNEP). Los rangos de concentraciones que inhiben el 50% de la viabilidad celular mostraron un potente efecto inhibitorio de la proliferación para JIB-04 (20-250 nM) y GSK-LSD1 (120-650 nM). En el caso de DZNEP (140nM-878µM), el efecto dependió de la línea celular. Luego mediante ensayos de apoptosis y ciclo celular encontramos que JIB-04 induce un potente arresto celular e inducción de apoptosis en células de HCC (t test). En ambos casos Más aun, se observó una disminución en la expresion de genes relacionados con la proliferación celular (CCNB1, PCNA, SKP2) e inducción de la expresión de genes antiproliferativos/proapotóticos (DDIT4 y CCNG2) en células tratadas con JIB-04. Finalmente, el potencial terapéutico de JIB-04 in vivo se evaluó en ratones C3H que poseían tumores generados mediante la inoculación intrahepática directa de células de HCC (línea Hepa129). Sorprendentemente, todos los animales tratados con JIB-04 (50mg/kg día por medio) mostraron respuesta tumoral completa al momento del sacrificio (día 15). Nuestros resultados sugieren que las enzimas epigenéticas son potenciales blancos terapéuticos para el tratamiento del HCC. Más aun, inhibidores específicos de las mismas, pueden ser considerados como una potencial herramienta terapéutica para el HCC.