Efectos de la dexametasona sobre la supervivencia de las células del epitelio pigmentario de la retina

MARQUIONI-RAMELLA MD; BACHOR TP; MARAZITA M; SUBURO AM; TATE P

Congreso; XI congreso de Asociación de investigación en Visión y Oftalmología (AIVO); 2016

AIVO

Los glucocorticoides (GCs) son de uso frecuente y de gran importancia en oftalmología para tratar diversas condiciones o enfermedades oculares. La dexametasona (DEX), es frecuentemente utilizada en el tratamiento del edema macular diabético. Por lo tanto, estudiamos la viabilidad de las células ARPE-19 (línea celular de epitelio pigmentario de la retina, EPR, humano) expuestas a diferentes concentraciones de DEX en medios con diferente contenido de glucosa y suero. Métodos. Se emplearon medios DMEM con baja y alta glucosa (LG-DMEM, 5.6 mM y HG-DMEM, 25 mM), con 1 o 10% de suero fetal bovino (S1 y S10), con distintas concentraciones de DEX-fosfato (0, 0.08, 0.32 o 1.28 mM,). Después de 24 h de tratamiento, se evaluó la inducción de muerte celular mediante naranja de acridina/bromuro de etidio (AO/EB), y la viabilidad celular mediante 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). Además, se evaluaron dos marcadores de diferenciación del EPR: las proteínas retinoid isomerohydrolase (RPE65) y cellular retinaldehyde binding protein (CRALBP), mediante Western blot. Resultados. Los niveles más altos de DEX-fosfato (1.28 mM) resultaron tóxicos en todas las condiciones. Las concentraciones más bajas (0.08 mM) aumentaron la muerte celular en los medios con baja glucosa (17-18%), independientemente de los niveles de suero. El aumento de muerte celular en alta glucosa no fue significativo. En el ensayo de MTT, los niveles de densidad óptica (OD) fueron 27 % superiores en HG-DMEM-S10 que en los restantes medios. DEX-fosfato 0.08 mM redujo la OD aproximadamente 60% en los cultivos S1, y 40% en los S10, aún en alta glucosa. La concentración de glucosa no modificó significativamente los niveles de CRALBP en los medios S10, pero aumentó los de RPE65 en HG-DMEM-S10. En presencia de 0.08 mM DEX-fosfato los niveles de CRALBP disminuyeron un 40% en LG-DMEM-S10 y solo en un 10% en HG-DMEM-S10. Los niveles de RPE65 siguieron un patrón semejante. Conclusiones. DEX-fosfato presentó toxicidad para las células ARPE-19, que parece exacerbarse en los medios con baja glucosa.