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El carcinoma de células renales (CCR) es el cáncer urológico más letal y representa el 2-3% de todos los tumores sólidos. El subtipo más frecuentees el Carcinoma Renal de Células Claras (CRCC), constituyendo aproximadamente el 80% de los casos. Recientemente, se demostró que las célulasmadres cancerígenas (CMC), una subpoblación anómala de células tumorales, podrían ser mediadores de la diseminación metastásica y de laresistencia al tratamiento. El estudio de estos núcleos ricos en CMC se ve facilitado con la técnica de formación de colonias tridimensionales(tumorisferas) que permiten una evaluación fenotípica y cinética de las unidades de crecimiento tumoral, permitiendo el diseño de modelosmecanísticos posteriores relativos a la progresión.El objetivo de este estudio fue implementar y describir la cinética de crecimiento y la morfología de los microesferoides cultivados a partir de líneastumorales renales humanas como modelos básicos para posteriores estudios mecanísticos in vitro.En este estudio, se cultivaron en diferentes condiciones de composición de medio de cultivo (DMEM F-12 y/o RPMI 1640 suplementado con 1 y 10%de suero fetal bovino) varias líneas celulares de CCR (Caki-2, Caki-1 y ACHN) en condiciones de bloqueo de adherencia para facilitar la formación delos esferoides. Se tomaron como cultivos control los de la línea de origen embrionario renal HEK-293 en idénticas condiciones. De las cuatro líneascelulares renales estudiadas, sólo las esferas 3D formadas a partir de HEK-293 y Caki-1 aumentaron significativamente de tamaño con morfologíaesférica uniforme, mientras que las líneas Caki-2 y ACHN no revelaron crecimiento agregado uniforme registrado fotográficamente con unmicroscopio de luz invertida (Olympus) magnificación:5X y el software ISCapture. Por lo tanto, los ulteriores ensayos de cinética se realizaron con lalínea Caki-1 y HEK-293. Esta última reveló un incremento sostenido, alcanzando un tamaño promedio de 500 micras hasta 7 días de cultivo, mientrasque las células Caki-1 no se mantuvieron a largo plazo, revelando que las células de esta línea conservan autoagregación con pluripotencialidadlimitada, ya que comenzaron a desagregarse desde el tercer día de cultivo.Posteriormente, las microesferas fueron fijadas con formol bufferado al 10% y fueron analizadas morfológicamente con microscopía electrónica debarrido (MEB) identificando sus particularidades a medida que progresaba su crecimiento, permitiendo apreciar los cambios de la morfología de lainterface de contacto con mínima interferencia y manipulación.Se concluye que a diferencia del cultivo celular en monocapa, las tumorisferas permiten imitar en gran medida el comportamiento y la organización delas células in vivo siendo las más favorables para los experimentos básicos de pluripotencialidad y estudios de condiciones microambientales parael desarrollo tumoral.