Estudio de la eficacia del tratamiento sérico local en la regeneración muscular in vitro post intoxicación botrópica

ECHEVERRÍA, SILVINA; FUSCO, LUCIANO; GAY, CLAUDIA C.; VAN DE VELDE, A; BUSTILLO, SOLEDAD

Corrientes

Jornada; XXIII Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2017; 2017

Universidad Nacional del Nordeste

El envenenamiento por serpientes del género Bothrops induce efectos sistémicos y alteraciones patológicas en el sitio de inyección del veneno comonecrosis, edema, hemorragia y formación de ampollas, que pueden en algunos casos conducir a daño permanente del tejido circundante a la herida yla discapacidad o amputación del miembro afectado. El tratamiento específico consiste en la administración de antiveneno por vía endovenosa y lacantidad de ampollas que se suministran a la víctima depende de la gravedad del cuadro. Si bien la vía vascular asegura una rápida distribución de losanticuerpos del suero antiofídico y el control de las alteraciones sistémicas causadas por el veneno, no siempre ocurre lo mismo en el sitio de lamordedura donde se ha demostrado que trazas de veneno permanecen en el músculo durante varios días posteriores a la intoxicación y podrían evitaruna regeneración exitosa. En este trabajo se propuso estudiar una terapia local complementaria al tratamiento endovenoso con antivenenos y evaluarsu eficacia en la miogénesis sobre un modelo in vitro. Para ello, un grupo de ratones adultos CF-1 (18?22 g de peso) fueron inoculados con 50 µg deveneno de B. alternatus en el músculo gastrocnemio. Luego de 1h, la mitad de los ratones intoxicados fueron inyectados en el mismo músculo con20L de antiveneno bivalente comercial (INPB Anlis ?Carlos G. Malbran?). Esta relación fue establecida mediante ensayos de neutralización totalde las actividades hemorrágica y hemolítica del veneno de B. alternatus. Ratones inoculados solamente con el antiveneno fueron utilizados comocontrol. Para evaluar el efecto sobre la regeneración muscular, se utilizó el modelo de mioblastos murinos (línea C2C12). Animales con y sin tratamientolocal fueron sacrificados luego de 3, 6 y 24h post-intoxicación y a partir de los músculos gastrocnemios se prepararon homogenatos musculares. Lascélulas mioblásticas se expusieron a estos homogenatos con el fin de evaluar su efecto en la miogénesis a través de los cambios morfológicos pormicroscopía de contraste de fase. Los resultados obtenidos en la diferenciación miogénica evidenciaron ser diferentes entre ratones tratados y notratados luego de 6 y 24h post-intoxicación. A estos tiempos, en los ensayos realizados con homogenatos de músculos tratados se observaronmioblastos alineados y fusionados formando miotubulos multinucleados característicos del tejido muscular. Esto no ocurrió con los homogenatosobtenidos de ratones sin tratamiento, observándose incluso áreas desprovistas de células debido al efecto del veneno todavía presente en elmúsculo. No se hallaron diferencias significativas entre los músculos tratados y los no tratados de ratones sacrificados luego de 3h posteriores a laintoxicación. Estos hallazgos sugieren que un tratamiento local con antivenenos, complementario al endovenoso, podría mejorar el cuadro deintoxicación, evitar en parte la necrosis muscular desencadenada por este vipérido y acelerar los procesos de regeneración muscular.