Concentración de proteínas en orina en caninos: Resultados preliminares

GAUNA PEREIRA, MARÍA DEL CARMEN; KOSCINCZUK, PATRICIA; DELGADO, MARÍA BELÉN; MANSILLA FERNÁNDEZ, SILVIA LORENA; CAINZOS, ROMINA PAOLA

CORRIENTES - CAPITAL

Jornada; XXIV Comunicaciones Científicas y Tecnológicas - 2018; 2018

SECRETARÍA GENERAL DE CIENCIA Y TÉCNICA - UNNE

Procesos como glomerulonefritis alteran las propiedades de selectividad de los capilares glomerulares resultando en proteinuria. La proteinuriaglomerular se caracteriza por la presencia de albúmina y proteínas plasmáticas de tamaño molecular superior a la albúmina y la tubular tambiénpor albúmina, pero en este caso acompañada por proteínas de tamaño molecular inferior a la misma. Actualmente es relevante determinar la relaciónproteína/creatinina en la orina (UPC). Por sus características físico químicas diversas, las fracciones de proteínas pueden separarse mediante diferentestécnicas de electroforesis. Cada fracción tiene un significado clínico diferentes3.Nuevos datos sustentan la robusta utilidad clínica de la proteinuria comomarcador pronóstico de progresión de la ER crónica y también de complicaciones vasculares asociadas a esta. Por ende, la evaluación de la proteinuriase considera un elemento fundamental en la evolución de enfermedades. El objetivo es aplicar una técnica de concentración y dilución de orina encaninos que permita una evaluación de las distintas fracciones del proteinograma. Se trabajó con orinas de 5 caninos la densidad se evaluó medianterefractometría y se realizó un análisis rápido con Tiras de Urianálisis HEALTH MATE? VET-11 AC de 11 parámetros (glucosa, bilirrubina, cuerposcetónicos, densidad, sangre, pH, proteínas, microalbúmina, creatinina, nitritos y leucocitos). Para la determinación cuantitativa de Proteínas/Creatininaen orina (UPC) por método Proti U/LCR Wiener ® en mg/dl y la otra fracción fue destinada a la separación de las proteínas mediante electroforesis, paraesto la muestra debió ser liofilizada (para la concentración de proteínas) las reconstituciones posteriores fueron realizadas con agua destilada (solvente).La muestra liofilizada fue dividida en dos partes iguales y fueron usadas dos diluciones la primera con 100 microlitros de agua destilada y para lasegunda fracción se extrajo 50 microlitros de la primera dilución y se agregó 50 microlitros más de solvente. La corrida electroforética fue realizada ensoporte de acetato de celulosa gelificado. Para la tinción se utilizó Azul Brillante de Coomassie G y ácido acético (5% en metanol - agua) y latransparentización se realizó con la solución decolorante de Ácido acético 5% y metanol (1 + 9). De los 5 pacientes evaluados las densidades urinarias seencontraban comprendidas entre 1011 a 1036 con una media de 1025 siendo la capacidad de concentración renal de orina adecuada 2. Solo 3 dieronpositivos en al menos una cruz (30 mg/dl) a proteínas en la tira reactiva. Estas fueron evaluadas cuantitativamente (UPC) teniendo valores mínimos de0,21 y 0,37 máximo, con un valor promedio de 0,30 estos se encontraban dentro de valores normales. En la corrida electroforética de dos de lasmuestras liofilizadas no se obtuvieron resultados fehacientes, la dilución fue realizada con 100 microlitros de solvente. En cambio en una de ellas sepracticó otra dilución, se extrajeron 50 microlitros del material reconstituido anteriormente (100 microlitros totales) al cual se le agregaron 50 microlitrosmás de solvente, logrando así una dilución adecuada para la migración, esta se produjo en un tiempo de 25 minutos encontrándose dentro del tiempoindicado. La identificación de proteínas aun no se ha realizado ya que se encuentra en desarrollo el método objetivo de identificación de las proteínasurinarias en perros. En general cuando se detectan proteínas en la orina, una mayor investigación debería incluir consideraciones de verificación y de lamagnitud de misma a través del cociente proteína y creatinina ya que la medición de la tira reactiva es de tipo semicuantitativo y de, en cuanto a lalocalización de estas la electroforesis desarrolla un papel fundamental en la identificación de proteínas por su peso molecular, permitiendo ladiferenciación de enfermedades glomerulares o tubulares. La evaluación de las proteínas urinarias es útil no solo como método diagnostico sino comométodo diagnóstico y progresión del daño renal. Con respecto a la identificación de las proteínas, la limitante actual es el método apropiado para lasproteínas urinarias de caninos con la técnica de papel de acetato, puesto que para estas se requiere una mayor concentración de la muestra y lamayoría de las densitometrías realizadas para esta técnica el análisis es de forma subjetiva.Firmas: