Estudios de Impedancia Celular y de Expresión de Adrenomodulina en el Potencial Pro-angiogénico de Células Tumorales Renales Caki-2

MELANA COLAVITTA, JUAN PABLO; STOYANOFF TANIA R.; TORRES, ADRIANA M; RODRIGUEZ JP; AGUIRRE, MA. VICTORIA

Resistencia

Jornada; XXIII Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas de la UNNE; 2017

Secretaria general de Ciencia y Técnica de la UNNE

La hipoxia característica de los tumores sólidos, contribuye de manera local y sistémica a la progresión tumoral y a la falta de respuesta a la radioterapiay quimioterapia, lo cual provoca un incremento en la probabilidad de recurrencia de un tumor. La angiogénesis es un proceso crucial en la progresióntumoral y particularmente en la metástasis. El carcinoma renal de células claras (CRCC) es el subtipo histológico más común de cáncer renalrepresentando aproximadamente el 90% de los casos. Se caracteriza por una intensa vascularidad y la alta expresión de factores angiogénicos,implicando que existe una relación entre la angiogénesis tumoral, la respuesta celular al estrés hipóxico y la progresión tumoral. El objetivo de estetrabajo fue abordar el estudio de moléculas pro-angiogénicas tales como la adrenomedulina (AM) y sus correspondientes inhibiciones en el CRCC,utilizando una técnica de impedancia celular en tiempo real (Electric Cell-Substrate Impedance Sensing, ECIS). Existe escasa evidencia de lautilización de esta técnica para evaluar la angiogénesis y/o el potencial metastásico en el CRCC. Además, las funciones de las molécula proangiogénicamencionada y el efecto de su inhibición en tumores sólidos (como el CRCC), no están del todo esclarecidas o presentan controversias. Serealizaron cultivos celulares de Caki-2. Se determinaron ensayos de variaciones de impedancia celular frente a diferentes concentraciones de clorurode cobalto y de inhibidores de AM. La expresión de AM se evaluó por Western Blotting (WB), RT-PCR y qPCR a diferentes tiempos (0,12,24 y 36hs)frente a una concentración de Cloruro de Cobalto ( 100 microM).Los resultados obtenidos mostraron variaciones en la tasa de proliferación y migración frente a diferentes grados de estímulo hipóxico (concentracionesde cloruro de cobalto). Se evidenció una disminución del crecimiento celular frente a los distintos inhibidores de AM. La expresión de AM se incrementósignificativamente a las 12hs post Cloruro de Cobalto evaluadas por WB y RT-PCR. Estos resultados preliminares contribuyen a una mejorcomprensión de la biología tumoral y el abordaje de potenciales blancos terapéuticos anti-tumorales en relación con la angiogénesis