EL ESTRÉS DE RETICULO ENDOPLASMICO MEDIA LA APOPTOSIS ASOCIADA AL ESTRÉS HIPEROSMOTICO EN CARDIOMIOCITOS ADULTOS DE RATA

MORELL MALENA; MARIANGELO JUAN IGNACIO; BURGOS JUAN IGNACIO; VILA PETROFF MARTIN

Congreso; XXVI Congreso de la Sociedad Argentina de Hipertensión Arterial; 2019

En ciertas situaciones patológicas, como la isquemia, el shock séptico y el coma diabético, los cardiomiocitos pueden sufrir estrés hiperosmótico (EH). Este tipo de estrés está asociado con la disfunción contráctil y la muerte celular. Sin embargo, los mecanismos intracelulares implicados no han sido investigados en profundidad en miocitos adultos. Estudios recientes en células no cardíacas indican que el estrés osmótico podría inducir estrés de retículo endoplásmico (ERE). Dado que se reconoce que el ERE sostenido conduce a la apoptosis, evaluamos si el EH promueve el ERE en miocitos adultos de rata, y si este tipo de estrés es responsable de la muerte celular. El tratamiento crónico de miocitos durante 18hs con una solución hipertónica (SH) aumentó la expresión de los marcadores de ERE, GPR78, CHOP y Casp-12 activada (por inmunodetección por Western blot), en comparación con los miocitos tratados a una solución isotónica (SI), sugiriendo que el EH induce ERE. Por otra parte, observamos que en el cultivo de miocitos en SH disminuyó la viabilidad celular (% de células viables) y aumentó significativamente la expresión de Casp-3 activada (por inmunofluorescencia de caspasas), indicativa de apoptosis. A su vez, estos efectos fueron prevenidos con el agregado del inhibidor de ERE (4PBA), indicando que la apoptosis inducida por SH estaría mediada por ERE. A continuación, examinamos los mecanismos subcelulares por los cuales el EH desencadena el ERE. Observamos que la muerte celular originada por SH no se evita mediante la inhibición de distintos efectores del ERE, como la producción de ROS y NO, lo que indica que ambas moléculas no estarían involucradas. Sin embargo, el tratamiento con una SH en presencia de un quelante de Ca2+ (EGTA) o de un inhibidor de CaMKII (KN93), previno la muerte celular programada, sugiriendo que el ERE inducido por EH estaría mediado por un mecanismo dependiente de Ca2+ y CaMKII. Los grupos de valores fueron analizados por test estadísticos no paramétricos Mann-Whitney o Krustal-Wallis según correspondía (*p