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A. quitensis (A. hybridus H.B.K.) es una de las malezas más problemáticas en los cultivos de verano de Argentina. A pesar de ello, 20 años luego de la detección del primer caso de resistencia a herbicidas inhibidores de la AcetoLactato Sintasa (ALS) en esta especie, no hay reportes oficiales de los mecanismos moleculares causantes de dicha resistencia. En este trabajo, se amplificaron y secuenciaron los genes als de plantas resistentes de 5 poblaciones diferentes de A. quitensis pertenecientes a las provincias de Córdoba y Santa Fe, con el objetivo de buscar mutaciones que puedan dar cuenta de los fenotipos de resistencia cruzada a inhibidores ALS. Como resultado de la conducción de los experimentos, se encontró que todas las poblaciones presentaron al menos una de las previamente reportadas sustituciones Trp574Leu y Asp376Glu en la secuencia aminoacídica de la ALS. Apoyados en la extensa descripción bibliográfica de la resistencia causada por dichas mutaciones, podemos asegurar que estos resultados explican la resistencia cruzada de las poblaciones en estudio a inhibidores ALS. Asimismo, la amplia extensión de estas mutaciones en la región analizada alerta sobre la necesidad de utilizar herbicidas con diferente modo de acción luego de un control ineficiente de esta especie con cualquier inhibidor de la ALS. Este trabajo representa el primer reporte de mecanismos moleculares de resistencia a inhibidores ALS asociados al sitio de acción en poblaciones de A. quitensis de Argentina.