Efecto sobre la calidad fisiológica de las semillas soja sometidas a un protocolo de extracción de ADN

MONTECHIARINI NIDIA; MONASTEROLO LUISINA; PERMINGEAT HUGO; GOSPARINI CARLOS

Rosario

Congreso; XX Congreso y XXXVIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2018

Sociedad de Biología de Rosario

Los programas de mejoramiento para la obtención de cultivares comerciales de soja (Glycine max L. Merr.) implican la obtención inicial de una semilla híbrida (F1) proveniente de la fecundación dirigida entre dos parentales seleccionados y a partir de la cual, mediante eventos de autofecundación sucesivos se obtiene la nueva variedad estabilizada. La confirmación de su naturaleza híbrida para la F1 es luego necesaria. Sin embargo, los escasos descriptores morfológicos diferenciables entre parentales, dificultan la identificación fenotípica de las plantas F1. Los marcadores moleculares constituyen por lo tanto una herramienta valiosa para la identificación efectiva de las F1 a partir de una muestra de ADN foliar de las plantas híbridas potenciales. Esto requiere la siembra y conducción cuidadosa de las plantas a fin de garantizar un tejido sano, joven y fresco para la obtención de ADN de calidad. La posibilidad del análisis molecular a partir de la propia semilla F1 permitiría evaluar la condición híbrida evitando la necesidad de siembra para obtención de las plantas. Sin embargo, la toma de muestra de tejido podría afectar la calidad fisiológica de las semillas híbridas necesarias para continuar con el proceso de selección y mejora. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la calidad fisiológica de semillas de soja sometidas a un protocolo de extracción de ADN para evaluación de plantas de la generación F1. Semillas de soja DM4915 fueron cuidadosamente perforadas a nivel de sus cotiledones para la obtención de 7 mg de tejido promedio para la extracción de ADN. Las semillas tratadas (T) y los controles (C) se conservaron en ambiente fresco y seco durante 90 días. Se determinó el Poder Germinativo (PG) y el Vigor (V) cada 30 días hasta los 90 días después del tratamiento (DDT). A los 90 DDT, semillas C y T se sembraron a campo para evaluar la calidad de las plantas producidas. Se analizó la presencia de un gen constitutivo de soja para validar el protocolo de extracción de ADN. Las semillas C y T presentaron valores de PG de 98 y 99; 99 y 97; 97 y 80; 87 y 91% a los 0, 30, 60 y 90 DDT, respectivamente. En tanto, los correspondientes valores de V fueron 94 y 87; 97 y 77; 93 y 40; 83 y 65%, respectivamente. Las plantas C y T no presentaron comportamientos diferentes en su desarrollo a campo. La calidad y cantidad del ADN extraído fue adecuada para el análisis molecular. Los valores de PG para semillas T se mantuvieron altos y similares a los del C durante todo el tratamiento, en tanto el V se vio afectado por el tratamiento en todos los tiempos evaluados, con mayor severidad a partir de los 60 DDT. Adicionalmente, las plantas producidas de semillas T y C no presentaron diferencias en su desarrollo. Se concluye que, el protocolo de análisis molecular a partir de muestra de tejido seminal es apropiado, permitiendo una evaluación temprana de la efectividad de las F1 y el descarte de semillas autofecundas sin necesidad de siembra, con la consecuente eficientización de recursos que ello implica. Por otra parte, plantea un margen tiempo de 30 y 90 días entre la confirmación molecular de la F1 y la siembra definitiva de esta semilla a campo para continuar con el plan de mejoramiento, sin afectar sustancialmente el V y el PG, respectivamente.