IICAR   25568
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN CIENCIAS AGRARIAS DE ROSARIO
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Estudio del mecanismo responsable de la resistencia a graminicidas (inhibidores ACCasa) en Sorghum halepense
Autor/es:
PAPA JUAN CARLOS; PEROTTI VALERIA; MARTINATTO ANDREA; PERMINGEAT HUGO R; TUESCA DANIEL
Lugar:
Rosario
Reunión:
Congreso; II Congreso Argentino de Malezas ASACIM; 2018
Institución organizadora:
ASACIM
Resumen:
La detección temprana de las resistencias a herbicidas es crucial para el diseño de estrategias de manejo de malezas. Así, la dilucidación de los mecanismos moleculares involucrados en dichas resistencias contribuye, entre otras cosas, al desarrollo de ensayos basados en ADN que permiten un screening más rápido y a gran escala de dichas resistencias. Con este objetivo, se realizó el clonado del dominio carboxiltransferasa del gen que codifica la ACCasa plastídica, blanco de acción de los herbicidas del grupo A, a partir de una subpoblación de Sorghum halepense hallada en campos de Gobernador Crespo. Esta subpoblación mostró un factor de resistencia mayor a 11,08 a haloxifop- p ? metil en comparación con la sensible de la localidad de Zavalla. El estudio de secuencias permitió identificar dos alelos exclusivos de la subpoblación resistente. El alelo R1 es portador de la sustitución previamente reportada (I2041N) y el alelo R2 es una mutación nueva que podría contribuir al fenotipo de resistencia. Para evaluar esta hipótesis, mediante la propagación por rizomas, se obtuvieron plantas de sorgo de Alepo genéticamente iguales sobrevivientes a la aplicación del herbicida a la dosis de campo. Posteriormente, estos 12 clones fueron sometidos a ensayos de PCR alelo específica para confirmar la presencia de dichas mutaciones. Los análisis moleculares mostraron que el clon vegetativo C4 es portador de ambas mutaciones, mientras que el C7 posee sólo la mutación novedosa, ambos en heterocigosis. Así, en este trabajo se desarrolló un método simple basado en PCR alelo específica para la detección de mutaciones puntuales en el gen accasa. Por otra parte, se subclonaron las versiones susceptibles y resistentes en los vectores de expresión de la serie pET. La expresión de las formas recombinantes y su caracterización bioquímica permitirán determinar inequívocamente el grado de contribución de cada mutación al fenotipo de resistencia.