La tensión de oxígeno regula la expresión de AQP4 en placenta humana

SEHAYIAN, ABRIL; DAMIANO, ALICIA E; SZPILBARG, NATALIA ; REPPETTI, JULIETA; DI PAOLA, MAURICIO; MARTÍNEZ, NORA

La Plata

Congreso; Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2016

El oxígeno es un regulador clave del desarrollo y la función placentaria. La hipoxia en las primeras semanas es esencial para el desarrollo embrionario y de la placenta hasta que, luego de las 10-12 semanas de gestación, la tensión de O2 se incrementa. El factor inducible por hipoxia 1α (HIF-1α) juega un rol fundamental en la adaptación del trofoblasto a estos cambios. En patologías como la preeclampsia, una modificación anormal de las arterias espiraladas, lleva a fluctuaciones en la tensión de O2 que resultan en un daño por isquemia/reperfusión (hipoxia/reoxigenación [H/R]), lo que lleva a alteraciones en la expresión de muchos transportadores presentes en sinciotrofoblasto, como es el caso de las acuaporinas (AQPs).Previamente, informamos que en placentas preeclámpticas, hay un aumento en la expresión de AQP9, mientras que la AQP3 y la AQP4 se encuentran reducidas. A su vez, observamos cambios en la localización de estos transportadores en el sinciciotrofoblasto.En estudios posteriores, en explantos cultivados en normoxia, hipoxia y H/R, demostramos que los cambios en la tensión de oxígeno modulan a la AQP3 y AQP9, provocando las mismas alteraciones descriptas en placentas preeclámpticas.El objetivo de este trabajo fue estudiar la modulación de AQP4 por O2 en explantos cultivados en las distintas condiciones de oxigenación.Se analizó la expresión proteica por Western blot y la localización por inmunohistoquímica e inmunofluorescencia. Adicionalmente, analizamos el promotor de AQP4 para identificar posibles sitios de unión de HIF-1α.El tratamiento por hipoxia mostró un incremento de 1,6 veces en la expresión de AQP4, mientras que, luego de la reoxigenación, la expresión de AQP4 disminuyó significativamente acercándose a niveles basales. Los ensayos de localización mostraron que en normoxia la AQP4 está presente en membrana apical del sinciciotrofoblasto y en las células endoteliales. La marca aumentó en hipoxia, mientras que disminuyó en H/R. Ninguno de los tratamientos alteró su localización. El análisis del promotor mostró la presencia 6 sitios putativos que poseen la secuencia de unión de HIF-1α (CGTG). Estos resultados sugieren que la expresión de AQP4 placentaria está regulada por cambios en la tensión de oxigeno posiblemente por un mecanismo dependiente de HIF-1. Así, las alteraciones observadas en la expresión de AQP4 en placentas preeclámpticas podrían deberse a las alteraciones en la tensión de O2 que sufren estas placentas.