Un entorno lipídico desfavorable disminuye la expresión de caveolina 1 en placentas preeclámpticas.

CASTRO PARODI M; MARTÍNEZ N,; HERLAX V; MATE S; FARINA M; DAMIANO A

La Plata

Congreso; II Congreso Internacional - Facultad de Ciencias Médicas; 2015

La Caveolina-1 (Cav-1) es una proteínacrucial en la formación de las caveolas, microdominios rígidos de membrana ricosen colesterol y esfingolípidos. Estáinvolucrada en muchos procesos celulares como la diferenciación celular, donderegularía negativamente del ciclo celular, retardando la mitosis con el fin dedetener la proliferación y conducir a la célula a su diferenciación.Contrariamente a lo que ocurre en otros epitelios, ladiferenciación del trofoblasto se asocia con una reducción del número decaveolas, acompañado con una disminución de la expresión de Cav-1 y unamodificación la composición de fosfolípidos de la membrana plasmática del sincitiotrofoblasto(hST) resultantes de la fusión con las células de citotrofoblasto. Este procesoes esencial para el mantenimiento de un embarazo exitoso y alteraciones seasocian a condiciones patológicas tales como la preeclampsia. En placentaspreclámpticas (PE), se encontraron alteraciones en la composición lipídica dela membrana de hST y expresiones anormales de proteínas de transporte que alteraríanlas funciones de la placenta. Sin embargo, si estos cambios en la composiciónlipídica de la membrana del hST pueden afectar la expresión de Cav-1 enplacentas preeclámpticas se desconocen.OBJETIVO:Estudiar la expresión de Cav-1 en PE y analizarla composición lipídica del hST de estas placentas que pudieran estar asociadascambios en la expresión de esta proteína.MÉTODOS: Se estudió la expresión de Cav-1 en placentas normales (PN) (n=8) y PE (n = 8) por RT-PCR, Western blot e inmunohistoquímica. La expresión de Cav-1 también se evaluó en membranas resistentes a detergente (DRM) obtenidas por centrifugación en gradiente de sacarosa a partir de vesículas apicales y basales de PE y PN. Para el estudio de los fosfolípidos de membrana se extrajeron los mismos por el método de Bligh-Dyer, se separaron por cromatografía en capa delgada y se cuantificaron por el método de Fiske-Subarrow. El colesterol se determinó mediante un kit comercial. La fluidez de membrana se evaluó por resonancia paramagnética electrónica. Las especies moleculares de esfingomielina (SM) se analizaron y cuantificaron por cromatografía gaseosa y espectrometría de masas RESULTADOS: Por RT-PCR los niveles de transcripción de Cav-1, no mostraron diferencias entre PN y PE, aunque su expresión proteica disminuyó significativamente. Además, se observó una disminución significativa de la expresión proteica de Cav-1 en los DRMs de membranas apicales de PE. En cuanto a su localización, en PE, Cav-1 fue casi indetectable. En lo que respecta al contenido de lípidos, se observó un aumento de SM en las membranas apicales de hST de PE, sin cambios en la cantidad de colesterol. Además, la fluidez de estas membranas disminuyó significativamente. Los experimentos de espectrometría de masa indicaron un aumento en los ácidos grasos insaturados de SM en las mismas.CONCLUSIONES: Nuestros resultados muestran que la expresión de Cav-1 es casiindetectable en PE. En esta placentas se observó que en la membrana apical delhST hay un incremento en el contenido de SM, con ácidos grasos insaturados deSM volviéndola más rígida. Esto crearía un entorno desfavorable para laformación de caveolas y la inserción de Cav-1. Aunque en la PN, la reducción dela Cav-1 con el avance de la gestación es un proceso fisiológico causado por lafusión celular, en PE la marcada disminución de esta proteína podría estarasociada a fallas en el proceso de sincialización.