El glutamato y la actividad eléctrica regulan la actividad mitótica retiniana en zebrafish.

LAMBERTI ML; VENERA G; FAILLACE MP

Buenos Aires, Chascomús.

Taller; II Taller de Biología Celular y del Desarrollo; 2014

Fundación del Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario (IBR)

El glutamato en la retina de vertebrado transmite la información desde los fotorreceptores a las células bipolares (CB) y de éstas a las células ganglionares (CG) que envían la información lumínica a los centros cerebrales de procesado visual. La retina de zebrafish, a diferencia de los mamíferos, tiene la capacidad de crecer durante la vida adulta a partir de una zona llamada zona ciliar marginal (CMZ). Esta región está compuesta por stem cells y progenitores retinianos. Previamente, demostramos la existencia de un pico de proliferación celular en la CMZ en la fase diurna, cuando los niveles de glutamato son menores. Por consiguiente, se examinó si la actividad mitótica en la CMZ podía ser regulada por el glutamato retiniano. Se utilizó: 1. L-aspartato, que bloquea los receptores y los transportadores de glutamato. 2. L-AP4 que es un agonista del mGluR6 en las CB-ON. 3. DNQX o APV que antagonizan a los receptores AMPA y Kainato o NMDA, respectivamente. Los receptores AMPA y Kainato se expresan en las CB-OFF y las CG, donde también se encuentran los receptores NMDA. 4. Glutamato 50 µM. 5. TTX, que bloquea los canales de sodio dependientes de voltaje. Todos los compuestos se inyectaron en el vítreo y se trataron las retinas in vivo con BrdU por 4 h previas al sacrificio de los peces. El BrdU se incorpora al DNA durante la fase S del ciclo celular. Las células marcadas se encontraban en dicha fase o en la fase G2 al momento del sacrificio. Sólo los tratamientos con L-Aspartato y DNQX incrementaron significativamente el número de células proliferativas en la CMZ. El tratamiento con TTX (una semana) disminuyó significativamente la proliferación pero no se identificaron cambios con un tratamiento agudo de 20 h. El glutamato endógeno, liberado por las células retinianas en respuesta al ciclo luz/oscuridad, regula la actividad mitótica en la CMZ y por ende el crecimiento de la retina de pez cebra adulto. Asimismo, la despolarización de las células retinianas controla positivamente la actividad mitótica de los progenitores tanto en la CMZ como en la retina madura.