Rol del sistema de señalización de hormonas tiroideas en la proliferación y diferenciación celular durante el crecimiento y la regeneración retiniana de zebrafish adulto

BEJARANO, CLAUDIO ALEJANDRO; FAILLACE, MARÍA PAULA

C.A.B.A

Congreso; X CONGRESO NACIONAL DE INVESTIGACIÓN EN VISIÓN Y OFTALMOLOGÍA; 2014

ASOCIACION DE INVESTIGACIÓN EN VISIÓN Y OFTALMOLOGÍA (AIVO)- ARVO International Chapter Affiliate

Thyroid hormone signaling system role in regulating cell proliferation and cell differentiation in retinal growth and regeneration in Zebrafish Bejarano CA1,3, Faillace MP1,2 . 1. Dpto. de Fisiología y Biofisíca, Facultad de Medicina. UBA, Buenos Aires; Argentina; 2. IFIBIOCONICET, Facultad de Medicina. UBA, Buenos Aires; Argentina; 3. IQUIFIB-CONICET, Facultad de Farmacia y Bioquímica, UBA, Buenos Aires; Argentina. cbejarano@fmed.uba.ar Objetivos: Estudiar el rol de las hormonas tiroideas (TH) y sus receptores (TRs) en los procesos de proliferación y diferenciación neuronal tanto en el crecimiento como la regeneración de la retina de Zebrafish (danio rerio) adulto. Métodos: Se lesionaron las retinas de los peces (ZF) con una inyección intravítrea única de Ouabaína (OUA) y el control con una inyección de solución salina. Se separaron los animales en cuatro grupos y se trataron con TH (300µg/L) o con vehículo (NaOH) en el agua de la pecera hasta los 8 (8dpi) o 60 días post lesión (60dpi). Los peces fueron mantenidos en un ciclo diario de 14 h de luz y 10 h de oscuridad. Se procedió a la eutanasia de los peces a los 8 ó 60 dpi. Los grupos de 8 dpi recibieron un pulso de BrdU 24h previas a la eutanasia. Se realizó inmunofluorescencia simple y doble para detectar diferentes poblaciones retinianas sobre cortes. Se detectaron los niveles de ARNm de los TRs en la retina, mediante las técnicas de RT-PCR estándar y cuantitativa. Resultados: Se observó un incremento significativo de células inmunorreactivas para BrdU en los grupos lesionados y no lesionados tratados con TH a los 8 dpi (correspondiente al pico de proliferación celular). En el tratamiento a largo plazo con TH (60 dpi) observamos una disminución significativa en el número de células Bipolares (BCs) en el grupo de ZF previamente lesionados. También se evidenciaron cambios morfológicos en las BCs en los lotes tratados con TH respecto a los grupos controles. Se describió la expresión del ARNm de las diferentes isoformas de TRs en la retina de ZF bajo los diferentes tratamientos descriptos. Conclusiones: El sistema de señalización de las TH regula los procesos de proliferación y diferenciación tanto en la regeneración como en el proceso de crecimiento del tejido retiniano.