Biopsia líquida en gammapatías monoclonales.

TORREGUITART F; POMBO P; IOMMI MP; AGRIELLO EE; ENCINA T; SANDOVAL MJ

Mendoza

Congreso; XXIV Congreso Argentino de Hematología; 2019

Introducción: la sangre periférica (SP) es un tejido de fácil acceso para el estudio del tráfico celular, con mínima invasión para el paciente. La biopsia líquida se basa en la detección de marcadores (ADN tumoral) o de células neoplásicas en SP, con demostrada aplicabilidad en tumores sólidos. La citometría de flujo de nueva generación (NGF) es una metodología estandarizada con alta sensibilidad, especificidad y aplicabilidad actualmente utilizada para detectar células patológicas en controles de enfermedad mínima residual (EMR) en muestras de médula ósea (MO). Tal es así que este procedimiento brinda la posibilidad de detectar células plasmáticas tumorales (CPT) en circulación. Usando NGF se evaluaron las CPT de pacientes con diagnóstico reciente de gammapatía monoclonal (GM) en diferentes estadios: de significado incierto (MGUS), mieloma asintomático (MMS) y el propio MM sintomático.Objetivos: detectar, identificar y cuantificar CPT y normales (CPN) en pacientes con GM en ambos compartimentos (SP y MO).Material y métodos: se estudiaron 13 pacientes adultos (5 hombres y 8 mujeres; edad promedio de 72 años, rango de 42 a 85 años) muestras de MO y las correspondientes de SP. Paralelamente, se evaluaron 5 muestras de SP de donantes sanos con edades y sexo similares a la del grupo patológico. Los pacientes se clasificaron según los criterios del Grupo Internacional de Trabajo sobre el Mieloma (IMWG) en: 6 MGUS, 2 MMS y 5 MM.Las muestras de SP (5,2 - 10,7 mL) se procesaron siguiendo el protocolo estandarizado de EuroFlow (Bulk Lysis) y se inmunomarcaron con el panel EuroFlow-MM MRD de 2 tubos/8 colores. Se evaluó un rango de 5.9 x106-12.7 x106 células en muestras de SP utilizando un citómetro de flujo FACSCanto II (BD Biosciences, San José, EUA) y se analizó mediante el software Infinicyt 2.0 (Cytognos, Salamanca, España). Se determinaron las cadenas ligeras libres (CLL) en suero (Binding Site-plataforma SPAPLus).Resultados: En todos los pacientes y donantes sanos se detectaron CPN circulantes en SP (0,00103-0,3818%; 0,060-1,510 CP/uL). Se detectaron CPT circulantes en todos los pacientes estudiados con MM (100%) y SMM (100%), mientras que sólo en uno de los casos de MGUS. La proporción de CLL (patológica/normal) en MGUS osciló entre 1.1 y 3.2 mientras que en los de MM fue >370.Si bien en términos generales, las CPT circulantes mostraron un perfil de su inmunofenotipo similar a su contraparte medular, marcadores específicos como el CD138, CD38 y CD56 mostraron una menor intensidad media de fluorescencia en las CPT circulantes.Conclusiones: Si bien la casuística del trabajo es baja, se puede inferir que NGF presenta alta sensibilidad para detectar las CP circulantes en los pacientes con MM y MMS de reciente diagnóstico. Por otro lado, si bien en la mayoría de los pacientes con MM y MMS no se detectó CPT en SP, se correlacionaron con una baja proporción de CLL, sugiriendo que estos casos de MGUS podrían asociarse con un menor riesgo de progresión.