Síntesis y ensayos sobre células HCT116 de Nanopartículas de magnetita cubiertas con ácido ascórbico

MARTIN MARIA JULIA; GENTILI, CLAUDIA; MONTIEL SCHNEIDER, MARIA GABRIELA; LASSALLE VERONICA

Villa Carlos Paz

Congreso; IV NanoCórdoba. Jornadas sobre Nanociencia y Nanotecnología.; 2017

NanoCordoba 2017

Las nanopartículas magnéticas de óxido de hierro (magnetita y maghemita) han demostrado que pueden ser valiosas herramientas para el diagnóstico de cáncer y otras enfermedades como las infecciosas y cardiovasculares [1]. El éxito de la aplicación de las mismas dependerá de su estabilidad, inocuidad y selectividad a los tejidos afectados. Estos factores dependen del material que se elija para recubrir las nanopartículas. En el presente trabajo se utilizó ácido ascórbico (AA) como recubrimiento dada su biocompatibilidad y la mayor acumulación de este compuesto en células tumorales con respecto a las normales [2]. Las nanopartículas de magnetita se sintetizaron por el método de co-precipitación inversa. Las sales de Fe+2/Fe+3 fueron agregadas junto con polietilenglicol (PEG) sobre una solución de NaOH 5 M a 70ºC. Una vez precipitada la magnetita se agregó el AA.La caracterización de las nanopartículas obtenidas (MAG-AA) mediante la técnica de dispersión de luz determinó diámetros hidrodinámicos entre 142-148 nm, observándose un incremento de 50 nm en el radio hidrodinámico luego de dos meses de almacenar las partículas en dispersión acuosa. También se caracterizaron las MAG-AA mediante IR, TEM y XRD.Los ensayos in vitro se realizaron en la línea de carcinoma de colon humano HCT116. La evaluación de la citotoxicidad se realizó mediante el ensayo MTS celltitler 96 (promega). Se utilizaron 3 diluciones de nanopartículas de 1, 10 y 100 μg/ml. El análisis mostró que la viabilidad celular no se afectó luego de 48 hs de incubación de las células con las distintas dosis de MAG-AA. Por otro lado, se realizó una siembra de 50000 células HCT116 en cajas de 35 mm de diámetro y se trataron con las mismas diluciones de nanopartículas del ensayo anterior. Luego de 24 horas, las células se lavaron varias veces con PBS. Posteriormente se trataron con un buffer lisis y se analizó la presencia de hierro en el lisado celular por absorción atómica. Para todas las dosis se detectó hierro lo que indicaría que las MAG-AA o bien se internalizan o quedan adheridas a la superficie celular.Estos resultados alientan a continuar con la investigación acerca de la utilización de MAG-AA como agente de contraste para la detección de tumores y/o para el desarrollo de nanopartículas teranósticas.