Efectos de fitoestrógenos en la proliferacióny migraciónde células normales y tumorales. Vias de señalización involucradas

LEZCANO VIRGINIA; MORELLI SUSANA.

Sierra de la Ventana, Pcia Bs As

Congreso; XXXII Reunión Anual AAOMM; 2015

Sierra de la Ventana, Pcia Bs As

Existe una tendencia global al uso de compuestos bioactivos naturales, como los fitoestrógenos, presentesen gran variedad de alimentos que poseen numerosos efectos saludables, entre los que se destacanActualizaciones en Osteología, VOL. 11 - Supl. I - 2015efectos anticancerígenos, antioxidantes y cardiovasculares. Las isoflavonas como la genisteína (GEN) y los flavonoles como la quercetina (QUE) son polifenoles con una gran  similitud estructural a los estrógenos humanos.En el presente trabajo se estudian los efectos de los fitoestrógenos GEN y QUE en células receptor de estrógeno positivas: preosteoblásticas normales de calvaria de ratón (MC3T3) y células tumorales de cáncer mamario humano (MCF-7). La migración celular es un proceso importante en la cicatrización, colocación de implantes, reparación de fracturas, respuesta inmunitaria, entre otros. Los errores durante este proceso tienen consecuencias patológicas, entre ellas la formación de tumores y metástasis. Para estudiar el efecto de QUE y GEN en la migración de MCF-7 y MC3T3 se utilizó el ensayo de reparación de la herida.Los resultados muestran que, en células preosteoblásticas normales, GEN estimula la reparación de la herida en forma dosis-dependiente con un porcentaje de cierre a las 24 horas de tratamiento del 40,98±4,39%; 59,86±1,85% (p˂0,01) y 78,95±4,82% (p˂0,01) para control, 0,01 μM y 1 μM, respectivamente. Además, QUE induce el cierre y la reparación de la herida, sin diferencias significativas entre las dosis estudiadas, siendo69,84±3,69% (p˂0,01) para 1 μM y 67,13±3,99% (p˂0,01) para 10 μM. La proliferación celular se evaluó mediante el ensayo de exclusión del colorante azul de tripan. Luego de 48 horas de tratamiento se contaron las células que excluyen el colorante (vivas). GEN y QUE 1 μM aumentan el número de preosteoblastos normales en 145,66±5,76% y 150,16±5,58% (p˂0,05), respectivamente, y no modifican la proliferación de célul astumorales. Una dosis mayor de QUE (100 μM) produce un efecto inhibitorio de la proliferación en ambaslíneas celulares, siendo máxima la inhibición en células tumorales. Dado que numerosos trabajos demuestran el poder antioxidante de los polifenoles, fue de interés evaluar la acción de GEN y QUE en la apoptosis inducida por H2O2 en preosteoblastos. El pretratamiento (48 h) con los fitoestrógenos previno la muerte celular por estrés oxidativo y resultó más eficaz la dosis mayor de GEN (1 μM) (Ctrl. vs. GEN, 26,8±4,21 vs. 7,6±1,8, p˂0,05). Las vías de señalización involucradas se estudiaron por Western blot midiendo los niveles de fosforilación de las proteínas Erk1/2, Akt y Bad; luego del tratamiento con QUE a 5, 15, 30 y 60 min. QUE aumenta pErk1/2 en forma dosis-dependiente, siendo máximo a 15 min. Además, QUE 100 μM disminuye pAkt en todos los tiempos probados y esto conduce a la disminución de la fosforilación de la proteína proapoptótica Bad. La inhibición de la vía de supervivencia de Akt y Bad estaría involucrada en la muerte celular por QUE.En conjunto, los resultados indicarían que dietas ricas en polifenoles serían útiles como terapia alternativa en enfermedades óseas y tumorales, por sus efectos opuestos pero beneficiosos para ambos eventos.