Genotoxicidad del ibuprofeno evaluado por ensayo cometa en eritrocitos de Cnesterodon decemmaculatus

GONZALEZ NUÑEZ, AYELEN ANAHI; OSSANA N A; CAMPOS, LB; FERRARI L

Luján

Congreso; Congreso Argentino de Limnologia VIII; 2018

Universidad Nacional de Lujan

El ensayo cometa in vivo es utilizado en ecotoxicología para detectar el efecto genotóxico al ADN. El Ibuprofeno (IBU) es el antiinflamatorio, antipirético y analgésico no esteroide más utilizado mundialmente y ha sido detectado en cuerpos de agua de la provincia de Bs As. El objetivo de este estudio fue evaluar los efectos de dos concentraciones subletales de Ibuprofeno sobre eritrocitos de sangre periférica en adultos de Cnesterodon decemmaculatus.Los peces fueron aclimatados durante 7 días y alimentados ad libitum. Se realizaron ensayos agudos y crónicos (96 h y 12 días), con renovación del medio cada 4 días, con temperatura y fotoperiodo controlado (22°C, 16L:8O) y aireación permanente. Para los ensayos se utilizaron XX adultos (ambos sexos) que se distribuyeron en tres grupos: [1] agua potable declorada (AP) (CN-control negativo), [2] AP + 10 ppm Ciclofosfamida (CP-control positivo), [3] AP + 0.05 ppm Ibuprofeno (IBU50), [4] AP + 0.1 ppm Ibuprofeno (IBU100). Los animales se alimentaron con el 2 % de su masa corporal, y diariamente se controlaron los parámetros fisicoquímicos y la concentración de IBU en los medios.Finalizado el período de exposición los animales fueron anestesiados en frío, se decapitaron y se dejó caer una gota de sangre en un tubo Eppendorf con PBS. Se centrifugó y el pellet se resuspendió con agarosa. Las células fueron sometidas a lisis, y electroforesis (buffer pH 13, 25 mV, 250 mA, 4 °C) y se examinaron bajo microscopio de epifluorescencia. Se calculó el IDG (Índice de Daño Genómico) y el porcentaje de nucleoides con daño (grado II a IV).El IDG aumentó significativamente en los animales expuestos a CP, IBU50 e IBU100, a las 96 h y a los 12 d, como así también el porcentaje de nucleoides con daño. Estos resultados indicarían que este contaminante emergente produce inestabilidad genómica.