IFIS - LITORAL   24734
INSTITUTO DE FISICA DEL LITORAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Marcadores de espín: una herramienta útil para evaluar dominios ricos en colesterol
Autor/es:
M.A. BAQUÉ; N.M.C. CASADO; V. GIORIA; G. MICHELOUD; J. CLAUS; A. M. GENNARO
Lugar:
Santiago del Estero
Reunión:
Congreso; XLIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2015
Institución organizadora:
SAB
Resumen:
El objetivo de este trabajo es investigar propiedades biofísicas de dominios ricos en colesterol en células vivas por Resonancia Paramagnética Electrónica (EPR). Se estudiaron células de insecto de la línea celular UFL-AG-286 crecidas en cultivo. Como sonda paramagnética se utilizó el radical nitróxido doxil unido a dos tipos de moléculas: ácido esteárico (n-SASL, n= 5, 12 y 16), similar a las cadenas de los fosfolípidos, y colestano (CSL), con estructura análoga al colesterol. En los espectros obtenidos con n-SASL se observó la estructura hiperfina del radical nitróxido, con el usual gradiente de movilidad en función de la profundidad en la bicapa. La movilidad de las cadenas acílicas fue similar a la obtenida en LUVs unilamelares del PC de huevo con bajas concentraciones de colesterol. Para el caso del CSL en las células se obtuvo un espectro totalmente distinto, con la estructura hiperfina colapsada. Esto indica que en la membrana celular las moléculas de CSL están en contacto cercano entre ellas como para permitir una eficiente interacción de intercambio. Sin embargo, en los LUVs se obtuvieron espectros de CSL no colapsados.Para verificar que el CSL se ubica en dominios de membrana con alto contenido de colesterol, se trataron las células con metil-b-ciclodextrina, reduciendo en un 80% su contenido de colesterol. Posteriormente se marcaron con CSL y se obtuvieron espectros resueltos, similares a los obtenidos en LUVs. Podemos concluir que la diferente afinidad química de los marcadores permite sensar distintos entornos. CSL sensa los dominios ricos en colesterol de las membranas celulares, mostrando que son suficientemente pequeños como para colapsar por intercambio la estructura hiperfina. La reducción del colesterol provoca la disrupción de estos dominios. Se discutirá la correlación de estos resultados con la eficiencia de la infección por baculovirus en esta línea celular
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