Desarrollo de un modelo in vivo de inyección intrafolicular ovárica en bovinos.

MODINI, F; NOTARO, ULISES; SALVETTI, NR; CHIARAVIGLIO, JA; AMWEG, AN; ETCHEVERS, L; BELOTTI, E.M.; ORTEGA, HH

Jornada; VIII Jornada de Difusión de la Investigación y Extensión de la Facultad de Ciencias Veterinarias, UNL; 2020

La base fundamental de todo sistema productivo ganadero viable desde el punto de vista económico es la generación de la mayor cantidad posible de terneros con la mejor eficiencia reproductiva, caracterizada principalmente por índices reproductivos adecuados, tasas de concepción elevadas e intervalos parto-parto breves. Esto se traduce directamente en un mantenimiento y/o incremento en la producción lechera o en la producción de carne, según el sistema del que se trate.En los bovinos de leche se ha demostrado que los problemas reproductivos se triplican cuando la producción se duplica. Aproximadamente entre el 30-50% de las vacas lecheras durante el periparto se ven afectadas por alteraciones metabólicas o infecciones, lo cual genera un impacto económico negativo en la producción y en el bienestar general de los animales1. Uno de los principales factores que afectan los resultados económicos en la producción lechera son las fallas reproductivas que se presentan de manera muy frecuente en dichas vacas, debido a los altos requerimientos que tienen estos animales. Dentro de estas se incluyen el retraso en la reanudación ovárica pos-parto, la falla en la ovulación debido a la descoordinación de los eventos endocrinos que llevan a la persistencia de folículos anovulatorios por períodos prolongados de tiempo y que desencadenan enfermedades reproductivas tales como la persistencia folicular y enfermedad quística ovárica.La manipulación definida de un solo folículo utilizando una inyección folicular transvaginal guiada por ultrasonido en bovinos es un método establecido, que fue descripto por primera vez por Kot y col., (1995)2. Se ha demostrado que la inyección a través de la pared folicular no altera la función folicular. Las inyecciones intrafoliculares son ventajosas porque permiten la administración local de inhibidores de la ciclooxigenasa (NS-398), antiinflamatorios (indometacina), sustancias sintéticas (gonadotrofina coriónica humana, adenocorticotropina porcina), productos metabólicos (ácidos grasos no esterificados), anticuerpos, entre otros, en un determinado folículo y nos permiten estudiar sus efectos sobre los folículos sin tener en cuenta las consecuencias sistémicas. Los modelos antes mencionados han presentado una oportunidad para manipular y estudiar el proceso ovulatorio, así como para tratar las patologías relacionadas a la anovulación3.El objetivo de este estudio es describir los procedimientos realizados durante el desarrollo de un modelo experimental in vivo de inyección intrafolicular en ovarios bovinos.Los procedimientos efectuados con animales experimentales, se realizaron de acuerdo a la guía internacional de la FASS (Guide for the Care and Use of Agricultural Animals in Research and Teaching. Tercera Edición. Federation of Animal Science Societies, 2010) y fueron aprobados por el Comité de Ética y Seguridad del FCV bajo el protocolo 432/18. Se utilizaron 3 vacas de la raza Holando Argentino del tambo de la Escuela de Agricultura, Ganadería y Granja dependiente de la UNL, examinadas por tacto rectal y ultrasonografía mediante un equipo de ultrasonografía portátil Mindray Z6 Vet con transductor lineal transrectal (5.0 a 10 MHz 75L50EAV, Mindray, China), previo al comienzo de la experiencia para comprobar la regularidad de sus ciclos estrales y de su aparato reproductor. La inyección intrafolicular se realizó a través de un sistema de tubuladuras de doble vía acoplados a jeringas estériles de 1 ml, guiado mediante un sistema de ultrasonido Myndray Z6 vet, equipado con un transductor microconvexo (5.0-9 MHz 6C2P, Mindray, China) montado en una sonda transvaginal para aspiración folicular fabricada ad hoc.Mediante ultrasonografía transrectal se identificó en cada vaca, el ovario con el folículo de mayor tamaño, siendo los mismos de un tamaño de entre 12 a 14 mm de promedio de diámetro conjugado, posteriormente, se realizó una anestesia epidural a dosis baja (1 ml/100 kg de peso vivo), y se procedió a la introducción del transductor microconvexo acoplado a la sonda transvaginal, por dicha vía. Se fijó mediante palpación rectal el ovario de interés y visualizándolo en la pantalla del ecógrafo, se introdujo a través del parénquima ovárico una aguja hipodérmica 20G estéril, a través del fondo de vagina, acoplada a una punta de mandril de doble vía (WTA, Brazil), las cuales se conectaban cada una con una tubuladura de plástico flexible que en el otro extremo se acoplaban a una jeringa de 1 ml cada por cada tubuladura, Se procedió a extraer 0,2 ml de líquido folicular y a introducir 0,2 ml de solución fisiológica estéril al 0,9% cargadas en cada jeringa respectivamente. Se pudo evaluar la entrada de fluido en el folículo por la turbulencia evidente dentro del líquido folicular intraovárico en la pantalla del ecógrafo. Se realizaron evaluaciones transrectales ultrasonográficas y medición de los folículos tratados. Se evidenció que la reducción de tamaño del folículo de interés en los 3 animales no superó los 0.05 mm. El procedimiento contempló un tiempo aproximado de 15 a 20 minutos por animal.La técnica para la inyección folicular transvaginal guiada por ultrasonido, de sustancias directamente en los folículos ováricos fue probada con éxito. El desarrollo de la técnica de administración intrafolicular permitirá la utilización de la misma en la administración local de posibles candidatos terapéuticos para investigación y tratamiento de enfermedades relacionadas con la anovulación.