ICIVET-LITORAL   24728
INSTITUTO DE CIENCIAS VETERINARIAS DEL LITORAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Evaluación del potencial inmunoestimulante del ginsenósido Rg1 en células mamarias bovinas in vitro.
Autor/es:
SILVESTRINI, P; RENNA MS; DALLARD BE; BECCARIA C; CELLONE I; BARAVALLE C; ENGLER, CAROLINA; CALVINHO L.F
Lugar:
La Plata
Reunión:
Jornada; XII Jornadas y Reunión Anual de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria. AAIV 2019; 2019
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria
Resumen:
La terapia antibiótica para el tratamiento de mastitis bovina es uno de los pilares de los programas de control frente a esta enfermedad, sin embargo, el uso indiscriminado de antibióticos ha llevado a la generación de cepas bacterianas resistentes y a la aparición de residuos en leche. En los últimos años, la utilización de compuestos inmunomoduladores como nueva alternativa terapéutica y/o preventiva está en auge. Nuestro grupo de trabajo ha centrado las investigaciones en el estudio del extracto de Panax ginseng (Pg) como inmunomodulador, tanto en modelos in vivo como in vitro. Los ginsenósidos (saponinas), principales componentes activos de este extracto, han sido utilizados como adyuvantes en vacunas de uso veterinario. Uno de los ginsenósidos más abundantes es el Rg1, constituyendo entre el 0,37-0,50 % de un extracto de Pg. En base a estos antecedentes, el objetivo del trabajo fue evaluar el potencial inmunomodulatorio de Rg1 en células epiteliales mamarias y macrófagos bovinos in vitro. Con el fin de caracterizar la respuesta inmune inducida luego del tratamiento con Rg1 en una línea de células epiteliales mamarias bovinas (Transformed mammary epithelial cells, MAC-T) y en un cultivo primario de macrófagos aislados de secreciones mamarias de vacas Holando Argentino a los 14 días de la interrupción de la lactancia, se evaluó la expresión de ARNm por PCR en tiempo real de los receptores de reconocimiento tipo toll -2 y -4 (TLR-2 y TLR-4) y de las citoquinas pro-inflamatorias IL-1β, IL-6 y TNF-α. Brevemente, las MAC-T fueron tratadas con 10, 20, 50 y 100 µg de Rg1/ml durante 2, 6 y 24 horas mientras que los macrófagos fueron tratados con 50, 100 y 250 µg de Rg1/ml durante 2, 4, 8, 12 y 24 hs. Paralelamente, ciertos pocillos fueron incubados con medio de cultivo como grupo control. En forma complementaria, en los macrófagos tratados con Rg1 (125 y 250 µg/ml), se evaluó la expresión de CD14 (monocitos/macrófagos) y de CMH-II y CD80 como marcadores de activación mediante citometría de flujo. Como control positivo de activación se utilizaron LPS (2,5 µg/ml) y LTA (2,5 µg/ml). No se observaron diferencias en los niveles de expresión génica de TLR-2, TLR-4 y de citoquinas pro-inflamatorias en células epiteliales y macrófagos, entre las células tratadas con diferentes concentraciones de Rg1 y controles para ninguno de los genes evaluados (p>0,05). Por otro lado, en la población CD14+, tampoco se observaron diferencias en la expresión de CMH-II y CD80 entre las diferentes concentraciones de Rg1 utilizadas (p>0,05).Los resultados obtenidos permiten concluir que las concentraciones de Rg1 utilizadas en los ensayos con MAC-T y macrófagos, no lograron estimular la expresión receptores de la inmunidad innata ni inducir una respuesta pro-inflamatoria. Por otra parte, la falta de activación de los macrófagos aislados de secreción mamaria luego del tratamiento con Rg1 y con los estimulantes inespecíficos, podría deberse a que estas células al momento de la obtención, se encuentren funcionalmente comprometidas con el proceso de remodelación normal de la glándula mamaria durante la involución. Por lo tanto, a los fines de continuar con la evaluación del potencial inmunoestimulante del Rg1, se plantea la necesidad de realizar nuevos ensayos empleando células mononucleares de sangre periférica.