Evaluación de la capacidad adyuvante del ginsenósido Rg1 en ratones Balb/c inmunizados con un lisado de Staphylococcus aureus.

ENGLER, C; BARAVALLE, C; SILVESTRINI, P; RENNA, MS; BECCARIA, C; DALLARD, BE

Esperanza

Jornada; VII Jornada de Difusión y de la Investigación y Extensión de la FCV; 2019

Los avances tecnológicos en inmunología han proporcionado nuevas herramientas para el estudio de la inmunidad de la glándula mamaria y la patogénesis de la mastitis, principal enfermedad que afecta a los rodeos lecheros. En los últimos años, se ha planteado la necesidad de desarrollar nuevos inmunógenos que permitan una mayor reducción de la prevalencia de mastitis. En este sentido, los adyuvantes juegan un rol importante en la formulación de vacunas, incrementando la inmunogenicidad de los antígenos co-administrados. Los ginsenósidos (componentes activos de la raíz del extracto de Panax ginseng (Pg)) han sido utilizados como adyuvantes de vacunas de uso veterinario1. Hasta el momento han sido identificados más de 40 ginsenósidos, siendo uno de los más abundantes el ginsenósido Rg1, constituyendo entre el 0,37-0,50 % de un extracto de Pg. Por otro lado, los liposomas son vesículas biocompatibles, capaces de estimular respuesta inmune de base humoral y celular hacia diferentes antígenos2. En este contexto, el objetivo de este trabajo fue evaluar la respuesta humoral y celular producida por Rg1 en ratones inmunizados con un lisado de la cepa 5011 de Staphylococcus aureus (S. aureus).Brevemente, se utilizaron ratones hembras de la cepa Balb/c de 4 semanas de edad divididos en 5 grupos experimentales, detallados a continuación: » Lisado S. aureus (100 µg/ml) + Adyuvante incompleto de Freund » Lisado S. aureus (100 µg/ml) + Liposomas (4 mM) » Lisado S. aureus (100 µg/ml) + Rg1 (500 µg/ml) » Lisado S. aureus (100 µg/ml) + Liposomas (4 mM) + Rg1 (500 µg/ml) » Control (sin inocular)Los animales fueron inoculados3 veces por vía subcutánea (200 µl/dosis) en intervalos de 14 días. Dos semanas después de la última inoculación, los animales fueron sacrificados y por punción cardíaca se extrajo sangre (para la obtención de plasma), para evaluar la producción de anticuerpos anti-S. aureus. Paralelamente, en condiciones de esterilidad, se realizó la extracción de los bazos de los animales de todos los grupos experimentales, para la evaluación de la respuesta celular inducida. La respuesta humoral (IgG) inducida frente al lisado de S. aureus en los ratones inmunizados se evaluó mediante un ELISA indirecto. Previa sensibilización con 3 µg/pocillo de lisado S. aureus, los pocillos fueron lavados y bloqueados con PBS ? suero fetal bovino al 10%. Luego se incubaron con las muestras de plasma provenientes de los animales inoculados. La presencia de anticuerpos específicos fue evaluada mediante la incubación con el anticuerpo goat anti-mouse IgG conjugado con peroxidasa. Finalmente, se midió la absorbancia a 450 nm en espectrofotómetro. Los resultados obtenidos fueron expresados como el promedio del título ± desvío estándar. Como valor de corte se utilizó dos veces el valor de densidad óptica del grupo control.Los grupos ?Lisado S. aureus + Adyuvante incompleto de Freund? y ?Lisado S. aureus + Liposomas + Rg1? mostraron títulos de IgG mayores a los grupos ?Lisado S. aureus + Liposomas? y ?Lisado S. aureus + Rg1? (p