Desarrollo de un protocolo de toma de muestras ováricas para el estudio de la interacción entre el estado metabólico y reproductivo en el posparto de bovinos lecheros

DURANTE LI; ETCHEVERS L; MARELLI BE; LEIVA CJM; RODRÍGUEZ FM; ANGELI E; ORTEGA HH

Jornada; Jornada de difusión de la investigación y extensión. Universidad Nacional del Litoral.; 2018

En los sistemas de producción lechera, la performance reproductiva individual afecta la eficiencia deproducción del rodeo por su influencia en el intervalo parto-parto, parto-primer servicio, duración dela lactancia y porcentaje de reposición³. Para lograr tasas de concepción adecuadas, las vacas debenreanudar su ciclicidad ovárica lo más temprano posible, tener una involución uterina normal, serdetectadas en celo e inseminadas rápidamente luego del parto. Luego de un período variable deanestro, el crecimiento folicular se reanuda en la mayoría de las vacas a los 7-10 días posparto (DPP),asociado a un aumento transitorio de la hormona folículoestimulante 3-5 días después del parto. Lasvacas lecheras que reciben una correcta alimentación, que no están sometidas a estrés o a un balanceenergético negativo muy marcado, ovulan su primer folículo dominante alrededor de los 15-25 díasposparto².En el período de transición (PT), el cual transcurre desde tres semanas antes del parto hasta tressemanas posteriores al mismo, suceden una serie de modificaciones endocrinas que preparan al animalpara el parto y la lactancia. El PT es crítico debido a las complicaciones relacionadas con los cambiosmetabólicos, fisiológicos y anatómicos que condicionan la reanudación de la actividad ováricaposparto⁴. En este período, existe una compleja interacción entre el estado nutricional y reproductivode los animales donde las hormonas metabólicas pueden afectar distintos puntos del eje reproductivo¹.Es por ello que alteraciones a nivel metabólico podrían ejercer efectos perjudiciales sobre laperformance reproductiva, afectando el establecimiento de la dominancia folicular y la consiguienteovulación.Según lo expuesto anteriormente, nos planteamos como objetivo del presente trabajo optimizar unprotocolo de toma de muestras de ovarios de bovinos lecheros que nos permitiera evaluarposteriormente la interacción entre el estado metabólico y reproductivo en un período crítico del cicloproductivo de estos animales como es el posparto.El trabajo fue realizado con vacas multíparas de la raza Holando Argentino pertenecientes a unestablecimiento de la zona de influencia de la Facultad de Veterinaria (UNL), ubicado en la localidadde Hipatia a 60 km de nuestra Institución. Dicho establecimiento cuenta con aproximadamente 300vacas en ordeño. Los animales seleccionados (n=50) fueron aquellos que presentaron un estadosanitario y reproductivo óptimo. Todos los animales recibieron una dieta de base pastoril con lacomposición que se indica en la Tabla 1.El monitoreo del ciclo estral se inició a partir de los 7 ± 1 DPP utilizando un equipo de ultrasonografíaMindray Z6 Vet equipado con una sonda transductora transrectal de doble frecuencia de onda (5.0-7.5Mhz.). Este monitoreo se continuó cada 3 ± 1 días a fin de evaluar el comienzo de la emergencia ydominancia folicular. Cuando un único folículo alcanzó un tamaño promedio de 12 mm se consideróque se había establecido la dominancia folicular y se procedió a su aspiración. Para ello, se utilizó unsistema de ultrasonido digital Chison 8300 Vet equipado con un transductor microconvexo de 5,0MHz montado en una sonda transvaginal para aspiración folicular (Watanabe Tecnología AplicadaLtda., Brasil). Posteriormente, estos mismos animales fueron examinados a los 45 ± 2 DPP, previarealización de un protocolo de sincronización de celos (Ovsynch con CIDR) el cual comenzó a los 35 ± 2 días para así lograr obtener 10 días más tarde un folículo preovulatorio que fue aspirado siguiendoel protocolo detallado anteriormente.Tabla 1.Composición de la dieta de vacas en lactancia para 20 l de leche promedioDieta kg de Materia Seca (MS)Alfalfa 7,70Silo de Maíz 4,46Silo de Trigo 1,80Maíz Molido 3,50Trigo Molido 1,32Expeller de Soja 1,15Sales Minerales 0,19Consumo de MS 20,12 kgEl líquido folicular enriquecido en células de la granulosa (LF + CG) recolectado se centrifugó a2000g durante 10 minutos. Las CG fueron conservadas a -80ºC hasta su procesamiento para laextracción de ARN y proteínas, mientras que el LF fue almacenado en las mismas condiciones paraposteriores determinaciones hormonales. Además, se obtuvieron muestras de sangre por venopuncióncoccígea las cuales fueron procesadas para la obtención de suero o plasma para posterioresdeterminaciones hormonales y de biomoléculas como indicadores del estado metabólico yreproductivo de los animales. Conjuntamente, se determinó la condición corporal de los bovinos porinspección visual.Los resultados obtenidos demuestran que en el periodo de posparto la dominancia folicular se alcanzóen promedio a los 12 días con un tamaño folicular de alrededor de 12 mm. Además, la totalidad de losanimales presentaron un cuerpo lúteo a los 35 ± 2 días, indicativo de una ovulación previa y al menosun folículo mayor a 10 mm, condición óptima para el inicio del protocolo de sincronización de celos.La disponibilidad de muestras ováricas y de sangre en posparto nos permitirá evaluar indicadoresgenerales del estado metabólico de los animales y su incidencia en la performance reproductiva de losmismos.1- Kawashima, C.; Matisui, M.; Shimizu, T.; Kida, K.; Miyamoto, A. (2012). Nutritional factors thatregulate ovulation of the dominant follicle during the first follicular wave postpartum in high-producing dairycows. Journal of Reproduction and Development, 58(1), 10-6.2- Montiel, F; Ahuja, C. (2005). Body condition and suckling as factors influencing the duration ofpostpartum anestrus in cattle: a review. Animal Reproduction Science, 85, 1?26.3- Royal, M.D.; Darwash, A.O.; Flint, A.P.F.; Webb, R. (2000). Declining fertility in dairy cattle: changesin traditional and endocrine parameters of fertility. Animal Science, 70, 487-501.4- Sordillo, LM and Aitken SL (2009). Impact of oxidative stress on the health and immune function ofdairy cattle. Veterinary Immunology and Immunopathology, 128, 104-109