Evaluación del receptor de insulina en bovinos con persistencia folicular ovárica

RODRÍGUEZ FM; HUBER E; GAREIS NC; REY F; CATTANEO ML

Esperanza, Santa Fe

Jornada; V Jornada de Difusión de la Investigación y Extensión; 2017

Facultad de Ciencias Veterinarias

La producción láctea haaumentado en los últimos años en detrimento de la eficiencia reproductiva en elganado bovino, causando grandes pérdidas económicas. Una importante causa de sub-fertilidaden vacas de alta producción es la enfermedad quística ovárica (COD). Estaenfermedad se caracteriza por el desarrollo de un folículo con diámetrosuperior al ovulatorio en ausencia de tejido luteal que persiste en el tiempointerrumpiendo el ciclo normal reproductivo1. La patogenia de estaenfermedad es compleja e involucra un trastorno plurifuncional del proceso dela ovulación. Entre los factores que intervienen, se ha demostrado que lasconcentraciones subluteales de progesterona inducen un aumento en la frecuenciade pulsos de LH, inhibiendo el pico preovulatorio de la misma y en consecuencia,la ovulación, provocando el crecimiento y persistencia de folículos dominantes.Por otro lado, existen evidencias que sugieren la existencia de componentesintraováricos en estadios tempranos de la persistencia folicular que podrían causarel desarrollo de quistes ováricos2. Aunque no se encuentra completamente definido elmecanismo por el cual se presenta la enfermedad, diversos factores metabólicos comola insulina se han propuesto como mediadores determinantes de las alteracionesdescriptas.La insulina es uncomponente fundamental para promover la maduración folicular. Para mediar susrespuestas específicas debe unirse a su receptor en la membrana plasmática que desencadena una cascadade señalización intracelular. En folículos ováricos de bovinos, se detectó laexpresión del receptor de insulina (IR) en células de la granulosa y células dela teca. Diversos estudios sugieren que alteraciones en la cascada de señalizaciónde la insulina, participarían en disfunciones ováricas. En trabajos previos en nuestrolaboratorio hemos detectado cambios en la expresión del IR en vacas con COD3.Es por ello que nos propusimos como hipótesis de trabajo que una alteración en los nivelesde IR en estadios iniciales de la persistencia folicular afectaría la funcionalidadovárica y en consecuencia, favorecería el desarrollo de la COD. Por lo tanto,nos proponemos como objetivo determinar la expresión del IR en folículosováricos bovinos para conocer el momento crítico de la alteración de suexpresión utilizando un modelo de persistencia folicular bovina que nos permiteevaluar las primeras etapas de la formación de quistes. Para ello se utilizaron vacas de la raza HolandoArgentino examinadas por tacto rectal y ultrasonografía antes del comienzo dela experiencia para comprobar la ausencia de alteraciones en su tractoreproductor; y la normalidad y regularidad de sus ciclos estrales. Los animales fueron sometidos ala sincronización de sus ciclos estrales mediante el protocolo adaptadoG6G-Ovsynch4. Los animales del grupo control (C, n= 5) sólorecibieron el tratamiento G6G-Ovsynch. Los grupos experimentales con 0 (P0,n=5), 5 (P5, n=5), 10 (P10; n=5) y 15 días de persistencia (P15; n=5) además setrataron con dispositivos intravaginales de liberación lenta de progesterona(P4) hasta los 0, 5, 10 y 15 días de persistencia folicular respectivamente. Laactividad ovárica fue verificada por ecografía (Transductor lineal transrectal5 MHz, Honda HS101V, Japón) para evaluar la respuesta a los tratamientos. Losanimales fueron sometidos a ovariectomía bilateral en el día esperado para laovulación (P0) y a los 5 (P5), 10 (P10) y 15 (P15) días de persistenciafolicular, y en el proestro de los animales del grupo control (C). Sobre lasmuestras de ovario se realizó la técnica de inmunohistoquímica indirecta parala determinación de la expresión de IR siguiendo el protocolo descripto previamentepor Hein y col.3. La cuantificación del IR se realizó medianteanálisis digital de imágenes (% de área marcada) con el programa informáticoIMAGE PRO PLUS. Se evaluaron las células de la granulosa y de la teca de folículosen crecimiento y en los diferentes estadios de persistencia folicular. Los datos obtenidos fueron evaluados mediante el programaestadístico SPSS 11.0.1 para Windows. Se realizó un análisis de la varianza delos datos obtenidos de la inmunomarcación de los distintos tipos folicularesaplicando pruebas paramétricas para varios grupos (ANOVA), y como análisisposterior se aplicó el post-test de Duncan. Losresultados mostraron expresión del IR en células de la granulosa y en célulasde la teca en todas las categorías foliculares analizadas. Se observó una mayorexpresión del receptor en células de la granulosa de folículos terciariosrespecto a folículos secundarios, tanto en el grupo control como en el grupo depersistencia de 5 días (p<0,05). Por otro lado, se observó una mayorexpresión de IR en folículos terciarios del grupo P5 con respecto al folículopersistente del mismo grupo (p<0,05). Además, la expresión del IR fue similaren las células de la teca en todas las categorías foliculares analizadas.Si bien aúnresta evaluar otros componentes que intervienen en la respuesta a insulina, conestos datos podemos concluir que el IR se expresa a lo largo de la foliculogénesisy permanece disponible para captar insulina y participar en el desarrollofolicular. Durante la persistencia el IR se mantiene constante, por lo queindicaría que el receptor se expresa para captar la insulina disponible en el folículoque no sería suficiente para lograr la maduración folicular o permitir laovulación, lo que llevaría a la persistencia folicular y posterior desarrollode la COD.