ICIVET-LITORAL   24728
INSTITUTO DE CIENCIAS VETERINARIAS DEL LITORAL
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
DETECCIÓN DE MARCADORES INMUNOENDOCRINOS EN BIOPSIAS DE ENDOMETRIO DE VACAS LECHERAS: POSIBLE RELACIÓN CON LA SUSCEPTIBILIDAD A INFECCIONES UTERINAS.
Autor/es:
GAREIS, N.; ORTEGA, H.H.; VELÁZQUEZ, M.M.L.; PERALTA, M. B.; SCANDOLO LUCINI, D; REY, F.; MACIEL, M.; SALVETTI, N.R.
Reunión:
Otro; X REUNIÓN ARGENTINA DE PATOLOGÍA VETERINARIA 2016 Y DÉCIMO SEMINARIO DE LA FUNDACIÓN CHARLES DAVIS FOUNDATION EN ARGENTINA; 2016
Institución organizadora:
Faculatad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Litoral.
Resumen:
La intensificación en la producción lechera, tanto individual como por unidad de superficie, y el incremento en la producción individual está generando una mayor incidencia de enfermedades metabólico-nutricionales y de cambios inmunológicos que interactúan con las anteriores (Giuliodori et al., 2013). El objetivo del presente trabajo fue identificar marcadores inmunoendocrinos a nivel endometrial, en vacas primíparas o multíparas, con el fin de estudiar su relevancia como indicadores moleculares del estado inmunológico que reflejen una susceptibilidad a posibles infecciones uterinas.Para ello se tomaron biopsias uterinas según la técnica descripta por Chapwanya et al., (2010) , de vacas lecheras de la raza Holando Argentino ginecológicamente sanas, teniendo en cuenta el momento del ciclo estral (diestro). Los grupos estudiados consistieron en animales de primera lactancia (n = 3) y de dos o más lactancias (n = 4). Las muestras de tejido obtenidas se fijaron en formol bufferado al 10% durante 6-8 h a 4°C y se procesaron histológicamente siguiendo protocolos de rutina hasta su inclusión en parafina. Se efectuaron cortes seriados, de 4 μm de espesor destinados a las diferentes evaluaciones. Para la caracterización inicial se utilizó la coloración de hematoxilina-eosina. Los marcadores de interés estudiados en esta instancia fueron el receptor de progesterona (PR), mediador de la acción inmunosupresora de la progesterona, y los factores de crecimiento transformante beta1 (TGFb1), TGFb2 y TGFb3. Las inmunodetecciones se efectuaron mediante inmunohistoquímica indirecta empleando anticuerpos específicos. La reacción se reveló utilizando 3,3´ diaminobencidina como cromógeno y se realizó coloración de contraste con hematoxilina. Finalmente se digitalizaron imágenes microscópicas para analizarlas con el software Image-Pro Plus 3.0.1 (Media Cybernetic) siguiendo métodos ya descriptos (Ortega et al., 20072). Los resultados se analizaron a través de pruebas estadísticas no-paramétricas empleando el programa SPSS 10.1 (SPSS Inc. USA).Los resultados obtenidos demostraron que los marcadores inmunoendocrinos estudiados se expresan en epitelio luminal, en epitelio glandular y en estroma endometrial de vacas en lactancia. La expresión de PR no mostró diferencias significativas al comparar los niveles en epitelio glandular y estroma entre vacas primíparas y pluríparas (p>0,05). Asimismo, similares niveles de expresión fueron determinados para los marcadores TGFb1, TGFb2 y TGFb3 en dichos estratos celulares. Para el epitelio luminal, no fue posible obtener información cuantitativa debido al reducido número de imágenes obtenidas que contaran con dicha porción de tejido hasta ese momento. Sin embargo, para el caso de PR y TGFb3 una observación cualitativa de los resultados permitió identificar una intensa expresión en epitelio luminal en relación a lo observado en el estroma de la misma biopsia. Por el contrario, dichas diferencias en la intensidad de marcación no fueron notables para TGFb1 y TGFb2 entre dichos estratos celulares.Con estas primeras determinaciones y en función de los resultados descriptos, se pudo confirmar que los marcadores inmunoendocrinos estudiados se expresan en todos los estratos celulares a nivel endometrial durante el diestro tanto en vacas primíparas como en pluríparas sanas. Esto indica que se pueden utilizar los parámetros evaluados para determinar posibles alteraciones en la capacidad de respuesta inmunológica, ampliamente descripta para animales con altas exigencias metabólicas/nutricionales, dado que las mismas podrían verse reflejadas en la expresión de citoquinas con función reguladora, tales como TGFb1, TGFb2 y TGFb3 estudiadas así como de otras, y en presencia del receptor de progesterona a nivel endometrial.