Caracterización funcional e inmunogénica de la molécula de adhesión de Streptococcus uberis. Su valoración como potencial componente de una vacuna contra la mastitis bovina?

PERRIG M; RENNA M.S; CALVINHO L.F; MARCIPAR I; VEAUTE C; BARBAGELATA MS

Jornada; VII Jornadas Científicas de la Asociación Argentina de Inmunología Veterinaria.; 2014

Streptococcus uberis es uno de los principales patógenos causantes de mastitis bovina clínicas y subclínicas. La molécula de adhesión de S. uberis (SUAM) es uno de sus principales factores de virulencia, participando en la internalización de S. uberis en las células epiteliales mamarias mediante la unión a lactoferrina (LF). El objetivo de este trabajo fue evaluar a SUAM como potencial componente vacunal contra mastitis por S. uberis. La presencia y distribución de epitopes B fue analizada mediante los programas ABCpred y AAPpred observándose regiones potencialmente inmunogénicas a lo largo de toda la proteína. Por ello, se clonaron y expresaron en Escherichia coli, 4 fracciones de SUAM (SUAM-1fr, -2fr, -3fr y -4fr) que representaron los aminoácidos 74 a 736 de la proteína. Luego, se inocularon ratones Balb/c por vía intraperitoneal con 20 ug de cada una de las fracciones o SUAM nativa. Mediante ELISA indirecto, se determinó que todas las proteínas fueron inmunogénicas. SUAM-fr1 generó los anticuerpos con la mayor capacidad de reconocimiento hacia SUAM nativa. Mediante ensayos de unión en fase sólida, se observó que todas las fracciones de SUAM presentaron unión a LF. Sin embargo, solamente los anticuerpos contra las fracciones SUAM-1fr y -4fr interfirieron en la internalización de S. uberis en células epiteliales mamarias in vitro. Este es el primer trabajo que permite identificar las regiones inmunogénicas y funcionales de SUAM. Los resultados obtenidos permiten proponer a SUAM-1fr como potencial componente de una vacuna a subunidad contra mastitis bovina por S. uberis.