Determinación de AMH (Hormona Anti-Mulleriana) en Líquido Folicular de Bovinos con Folículos Persistentes Inducidos y Enfermedad Quística Ovárica Espontánea.

DÍAZ PU; STANGAFERRO ML; REY F; GAREIS NC; MATILLER V; SALVETTI NR; BARBERIS F; QUERCIA E; ORTEGA HH

Córdoba

Simposio; Décimo Simposio Internacional de Reproducción Animal; 2013

Instituto de Reproducción Animal de Córdoba

La EQO (Enfermedad Quística Ovárica) es una de las causas principales de infertilidad y pérdidas productivas en vacas lecheras. Una hipótesis sobre su patogenia es que existe un desequilibrio neuroendócrino en el eje hipotálamo-hipofisario-gonadal con una gran implicancia del componente ovárico. La AMH (Anti Mullerian Hormone) es un miembro de la superfamilia del TGF-β (Transforming Growth Factor β) especialmente conocida por su acción en la diferenciación sexual del feto macho. Este factor local también es producido por las células de la granulosa de los folículos ováricos, principalmente en preantrales y antrales tempranos, ejerciendo una inhibición local sobre la activación y crecimiento de folículos en fases tempranas de diferenciación. Asimismo, AMH reduce la respuesta a FSH de los folículos preantrales y antrales pequeños y de este modo, podría ejercer un rol negativo en el reclutamiento cíclico y en el proceso de selección del folículo dominante. En base a este concepto, se propuso estudiar la implicancia de este factor local sobre los estadíos iniciales de la EQO a través del desarrollo de un modelo de persistencia folicular y sobre casos espontáneos de campo. Para la inducción de folículos persistentes, se utilizaron 20 vacas Holando Argentino divididas en 3 grupos tratados (P5, P10 y P15) y uno control (C). Sobre éstos se realizó un protocolo adaptado del denominado G6G-Ovsynch, que consiste en la administración (día 0) de dos dosis de 150 μg de Prostaglandina (PG) separadas por 12 h. El día 2 se administraron 20 μg de un análogo de GnRH y el día 8 una segunda dosis de esta hormona. El día 15 se inyectaron dos dosis de PG separadas por 12 h. El día 16, a los animales tratados se les colocó un dispositivo intravaginal con 750 mg de progesterona para conseguir concentraciones subluteales de esta hormona (1-2 ng/ml). La persistencia de las estructuras ováricas fue confirmada diariamente mediante palpación rectal y ultrasonografía. Los dispositivos permanecieron durante 5, 10 y 15 días, momentos en los cuales se realizó la aspiración guiada por ecografía de los folículos persistentes para obtener líquido folicular (LF). Además se evaluaron muestras de LF de casos espontáneos de EQO (Q) diagnosticados a campo. Los niveles de AMH en LF se analizaron con un kit de ELISA comercial de acuerdo con las instrucciones del fabricante (AMH Gen II; Beckman Coulter). Se determinó una menor concentración de AMH en LF de los quistes (19,22 ± 2,89 ng/ml) en relación a los folículos preovulatorios controles (42,37 ± 6,18 ng/ml) y persistentes de 5 días (49,72 ± 1,86 ng/ml). La mayor concentración se encontró en los folículos persistentes de 10 días (84,95 ± 14,81 ng/ml) y 15 días (72,96 ± 12,52 ng/ml). En concordancia con estudios previos, los datos obtenidos establecen un aumento de la AMH durante la persistencia folicular, lo que llevaría a una inhibición en el desarrollo de folículos en distintas fases de crecimiento. La baja concentración de AMH en el líquido folicular en los quistes puede estar relacionada a la pérdida de la función de las células de la granulosa que ocurre cuando estas estructuras evolucionan dinámicamente durante un tiempo prolongado de persistencia. La información obtenida a partir de este trabajo permitirá, conjuntamente con la determinación de otras hormonas y componentes moleculares, comprender mejor la dinámica de formación inicial de los folículos persistentes como base de la etiopatogenia de la EQO.