CAMBIOS EN LA ACTIVIDAD MITOCONDRIAL INDUCIDOS POR HEPARINA EN EL ESPERMATOZOIDE CRIOPRESERVADO BOVINO FILOSA A, CÓRDOBA M.

FILOSA ANDREA; CÓRDOBA M

CABA

Jornada; V Jornadas Internacionales del INITRA; 2017

La heparina (HP) es un glicosaminoglicano presente en el tracto genital de la hembra bovina usado para la capacitación in vitro en dicha especie. Trabajos previos de nuestro laboratorio la vincula con cambios metabólicos, aumento de consumo de oxigeno celular (Burst) y modulación de adenilato ciclasa, tirosina quinasa y proteína quinasa C que favorecen la inducción del proceso espermático. El objetivo de este trabajo es estudiar la variación del potencial de membrana mitocondrial en espermatozoides criopreservados de bovino capacitados con heparina durante 15 minutos en medio TALP. La motilidad y vigor se evaluó por microscopia óptica en platina térmica a 37°C. La capacitación por medio de la coloración epifluorescente de Clorotetraciclina (CTC). La tinción mitocondrial 5,5', 6,6'- tetracloro-1,1', 3,3'yoduro de tetra-etil-benzimidazolil-carbocianina) (JC-1) permite distinguir entre alta y baja proporción de mitocondrias espermáticas activas. Cuando JC-1 se acumula como agregados dentro de la mitocondria, los espermatozoides presentan coloración rojiza, indicando alto potencial de membrana, mientras que cuando se acumula como monómeros lo hacen en verde (bajo potencial). Dicha evaluación se realizó mediante el uso de un citómetro de flujo BD FacsCanto II con 488 nm de EX y filtros FL1 (EM: 530/30 nm) y FL2 (EM: 585 nm). La emisión verde fue analizada con FL1 y la roja con FL2. Los datos fueron analizados por ANOVA y test de Tukey (p