Detección del gen mecC de un aislamiento de Staphylococcus saprophyticus de origen bovino

M. JACQUES; M.E. SREDNIK; E.R. GENTILINI; M. ARCHAMBAULT

Rosario

Congreso; XXIII Congreso Latinoamericano de Microbiología XIV Congreso Argentino de Microbiología 2016; 2016

ASOCIACIÓN ARGENTINA DE MICROBIOLOGIA

INTRODUCCIÓNLa mastitis bovina es una causa importante de pérdidas económicas en la industria lechera. Los estafilococos coagulasa negativos (ECN) son un grupo heterogéneo de bacterias aisladas frecuentemente de mastitis bovina, siendo los β-lactámicos unos de los antimicrobianos (ATM) de uso habitual en la terapéutica. Los ECN están asociados a meticilino-resistencia (MR) codificada por los genes mecA y mecC. Además se consideran ser reservorios de genes de resistencia. En este trabajo, se describe por primera vez un aislamiento de Staphylococcus saprophyticus mecC positivo aislado de mastitis bovina en Argentina. OBJETIVOSDetectar resistencia fenotípica y molecular de ECN frente a ATM frente de uso habitual en mastitis bovina. MATERIALES Y MÉTODOSSe estudiaron n=36 muestras de leche provenientes de vacas con mastitis clínica y subclínica de un establecimiento de Entre Ríos, con terapia antimicrobiana previa de β-lactámicos y otros antibióticos. A los estafilococos aislados, se les hicieron pruebas de susceptibilidad por difusión con monodiscos. Los aislamientos que presentaron MR, se analizaron por PCR en busca de los genesmecA y mecC.Perfil fenotípico de resistencia a antimicrobianos: se determinó con monodiscos (BBL): penicilina: PEN 10U, oxacilina: OXA 1 µg, cefoxitina: FOX 30 µg. Se utilizaron los puntos de corte del Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI, 2013).PCR: Se amplificó un fragmento de ~147 bp correspondiente al gen mecA según Zhang y col. (2005), y uno de ~300 bp correspondiente al gen mecC según Cuny y col. (2011). Se analizaron por electroforesis en gel de agarosa 2%. RESULTADOSDe las 36 muestras de leche, 1 aislamiento de ECN presentó resistencia a PEN, OXA y FOX, se realizó la determinación por PCR del gen mecA, pero no se lo detectó. Este aislamiento fue identificado como Staphylococcus saprophyticus. Con el conocimiento de la presencia de un gen homólogo al gen mecA (mecC), se realizó la detección del mismo también por PCR, siendo positivo al gen mencionado. Se secuenció el producto de PCR, mostrando 100% de identidad con el alotipomecC1 de la cepa S. xylosus S04009 y 97,7% de identidad con el alotipo mecC2 de la cepa S. saprophyticus 210. La reciente descripción del gen mecC y sus alotipos han sido informados por el momento en 4 especies ECN en Europa. CONCLUSIONESLos ECN son reservorios de genes de resistencia a ATM. La presencia de aislamientos ECN-MR enfatiza la importancia de la identificación y la determinación de la susceptibilidad a ATM. La prueba gold standard para la confirmación de MR es la detección molecular del gen mecA por PCR o la detección de PBP2a mediante un test de aglutinación con anticuerpos (CLSI, 2013). Se deberán considerar nuevas pautas, incluyendo la determinación del gen mecC.El monitoreo continuo de la resistencia de estos microorganismos frente a los ATM permitirán el manejo más racional de los mismos con el consiguiente beneficio para el animal, el productor y la salud pública.